細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-556培養(yǎng)條件
形態(tài)特性 上皮樣；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細(xì)胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G4傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-556培養(yǎng)條件冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-556培養(yǎng)條件操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-556培養(yǎng)條件注意事項：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)重組蛋白 Recombinant Zinc Finger Homeobox Protein 4 (ZFHX4)
信號素3A(SEMA3A)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3A (SEMA3A)
信號素3B(SEMA3B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3B (SEMA3B)
信號素3C(SEMA3C)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3C (SEMA3C)
信號素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
信號素3F(SEMA3F)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3F (SEMA3F)
信號素4A(SEMA4A)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 4A (SEMA4A)
信號素4B(SEMA4B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 4B (SEMA4B)
信號素5A(SEMA5A)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 5A (SEMA5A)
信號素5B(SEMA5B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)
性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)重組蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 18 (SOX18)
性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)重組蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2)
保亭哥納香Goniothalamus griffithii Cinnamyl cinnamate 肉桂酸肉桂醇酯 122-69-0 C18H16O2 ≥96%肉桂酸 trans-Cinnamic acid 140-10-3 148.16 C9H8O2
番瀉 Cassia angutifolia Vahl Sennidin B 番瀉苷元B 517-44-2 C30H18O10 ≥98%* Andrographis Paniculata Nees Andrographolide *內(nèi)酯 5508-58-7 C20H30O5 ≥98%
短葶山麥冬皂苷C Liriope muscari baily saponins C 87480-46-4 871 C44H70O17桑白皮Cortex Mori Sanggenon C 桑根酮 C 80651-76-9 C40H36O12 ≥98%
米仔蘭Aglaia odorata 24,25-Dihydroxydammar-20-en-3-one 24,25-二羥基達馬樹脂-20-烯-3-酮 63543-53-3 C30H50O3 ≥95%Glycitin 黃豆黃苷 40246-10-4 446.4 C22H22O10
黃芩Scularia baicalesis Naringenin 4',7-diacetate 4',7-二乙酸橘皮素酯 18196-13-9 C19H16O7 ≥97%(R)-3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-(((E)-3-(2-((E)-3,4-dihydroxystyryl)-3,4-dihydroxyphenyl)acryloyl)oxy)propanoic acid 丹酚酸A 96574-01-5 494.44688 C26H22O10
白頭翁 BAI TOU WENG Pulsatilla chinensis Oplopanaxoside C; Cirensenoxide G 白頭翁苷C 162341-29-9 C48H78O18 ≥98%1,3-Benzodioxole,5-[(1R,3aS,4S,6aS)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)tetrahydro-1H,3H-furo[3,4-c]furan-1-yl]-,rel- 辛夷脂素 31008-19-2 370.395
五味子醇乙 Gomisin A 58546-54-6 416.46 C23H28O7割舌樹Walsura robusta Dammar-20(21)-en-3,24,25-triol 達瑪樹脂-20(21)-烯-3,24,25-三醇 55050-69-6 C30H52O3 ≥95%
非洲防已堿 Columbamine 3621-36-1 338.38 C20H20NO4carboxyatractyloside tripotassium salt 羧基蒼術(shù)苷 77228-71-8 885.09 C31H43K3O18S2
瓜馥木Fissistigma oldhamii Isopedicin 6-羥基-5,7,8-*氧基黃烷酮 4431-42-9 C18H18O6 ≥95%107390-08-9 Garcinone D 9H-Xanthen-9-one,1,3,6-trihydroxy-8-(3-hydroxy-3-methylbutyl)-7-methoxy-2-(3-methyl-2-buten-1-yl)- 428.47492 C24H28O7
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-556培養(yǎng)條件鹽膚木Rhus chinensis Moronic acid 黃蓮木酸 6713-27-5 C30H46O3 ≥98%莽吉柿Garcinia mangostana BR-Xanthone A none 112649-48-6 C23H24O6 ≥95%
石韋Pyrrosia lingua Eriodictyol 7-O-glucoside 圣草酚-7-O-葡糖苷 38965-51-4 C21H22O11 ≥96%蓬莪術(shù)Curcuma zedoaria Hannokinol none 79120-40-4 C19H24O4 ≥95%
諾麗Morinda citrifolia 6-Hydroxyrubiadin 6-羥基茜草素 87686-86-0 C15H10O5 ≥97%Hesperetin 橙皮素 520-33-2 302.28 C16H14O6
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