細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；DU145-Cas9-540培養(yǎng)條件
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使Du145細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法 1:4~1:6傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：x,y；CSF1PO：10,11：D12S391：18,20；D13S317：12,14；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：13,13；D21S11：31,32,33；D2S1338：16,16；D3S1358：16,16；D5S818：10,13；D6S1043：11,11；D7S820：7,10,11；D8S1179：13,14；FGA：22,22；Penta E：12,12；TH01：7,7；TPOX：11,11；vWA：17,1
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；DU145-Cas9-540培養(yǎng)條件冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；DU145-Cas9-540培養(yǎng)條件操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；DU145-Cas9-540培養(yǎng)條件注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)重組蛋白 Recombinant Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4)
銅藍蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)
透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1(HABP1)重組蛋白 Recombinant Hyaluronan Binding Protein 1 (HABP1)
突觸核蛋白α(SNCα)重組蛋白 Recombinant Synuclein Alpha (SNCa)
突觸素(SYP)重組蛋白 Recombinant Synaptophysin (SYP)
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)重組蛋白 Recombinant Deoxyribonuclease I (DNASE1)
拓撲異構(gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白 Recombinant Topoisomerase II (TOP2)
唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素2(SIGLEC2)重組蛋白 Recombinant Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2 (SIGLEC2)
外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)重組蛋白 Recombinant Exostoses Like Protein 1 (EXTL1)
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)重組蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)
微管關(guān)聯(lián)蛋白1A(MAP1A)重組蛋白 Recombinant Microtubule Associated Protein 1A (MAP1A)
微粒體*S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)重組蛋白 Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)
異去氫鉤藤堿 Isocorynoxeine 51014-29-0 382.45284 C22H26N2O4石榴皮鞣素;安石榴林 Punicalin 65995-64-4 782.525280000001 C34H22O22
2-Hydroxyadenosine 巴豆苷; 異鳥苷 1818-71-9 283.24072 C10H13N5O5夾竹桃Nerium oleander Uzarigenin 烏沙甙元 466-09-1 C23H34O4 ≥97%
ginsenoside rb3 人參皂苷Rb3 68406-26-8 1079.2685 C53H90O22Glycoside O-4 麥冬皂苷B單硫酸酯 94898-61-0
berbamine 小檗胺 478-61-5 608.7233 C37H40N2O6千層塔 Huperzina serrata(Thumb.)Trev Huperzine C 石杉堿丙 147416-32-8 C15H18N2O ≥98%
云南百部Stemona mairei Sessilifoline A none 929637-35-4 C22H31NO5 ≥95%辛氏龍樹Dracaena sanderiana Obtucarbamate B 2-甲基-1,3-苯二氨基甲酸二甲酯 20913-18-2 C11H14N2O4 ≥95%
土槿皮乙酸-葡萄糖苷 艾葉Folium Artemisiae Argyi Eupatilin 異澤蘭黃素 22368-21-4 C18H16O7 ≥98%
黃花蒿 Artemisia annua L. Artesunate * 91487-94-4 C19H28O8 ≥98%傘形科植物紫花前胡 Peucedanum dicursium(Miq.) Decursin 紫花前胡素 5928-25-6 C19H20O5 ≥98%
芝麻素 sesamin 607-80-7 354.36 C20H18O6花椒Zanthoxylum bungeanum Decarine 德卡林堿 54354-62-0 C19H13NO4 ≥98%
雞屎藤苷 Paederoside 20547-45-9 446.43 C18H22O11S矮楊梅Myrica nana Porson 波森 56222-03-8 C22H26O6 ≥95%
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；DU145-Cas9-540培養(yǎng)條件537-73-5 異阿魏酸 3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid 194.19 C10H10O4大黃酚 Chrysophanic acid 481-74-3 254.24 C15H10O4
云南鼠尾草Salvia yunnanensis Tanshinone IIB 丹參酮IIB 17397-93-2 C19H18O4 ≥97%大魚藤樹Derris robusta Isoerysenegalensein E none 478158-77-9 C25H26O6 ≥97%
3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-葡萄糖麥冬苷元 白術(shù) Atractylodes macrocephala Koidz Atractylenolide I 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ 73069-13-3 C15H18O2 ≥98%
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