人白介素8(IL-8)ELISA試劑盒檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗人IL-8抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-8
會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入*化的抗人IL-8抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)
記的親和素。抗人IL-8抗體與結(jié)合在包被抗體上的人IL-8結(jié)合、*與親和素特異性結(jié)合而形
成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過氧化物酶的催化下
發(fā)出熒光，用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定化學(xué)發(fā)光值（RLU），IL-8濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相
關(guān)，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-8的濃度。
人白介素8(IL-8)ELISA試劑盒樣品收集:
1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集
血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿：抗凝劑*使用EDTA.Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可
檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
4. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞
會影響測量結(jié)果），稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量
體積比，比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記
錄。*在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂
解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分
鐘，取上清檢測。
5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測
6. 樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若不及時(shí)檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，
1-6月內(nèi)檢測，4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測。
8. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請根據(jù)人白介素8(IL-8)ELISA試劑盒實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先
做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù)）。
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