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閱讀:138發(fā)布時(shí)間:2018-2-10
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒在用螢火蟲熒光素酶定量基因表達(dá)時(shí) ,通常采用第二個(gè)報(bào)告基因來減少實(shí)驗(yàn)的變化因素。但傳統(tǒng)的共報(bào)告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不夠便利。因?yàn)楦髯缘臏y(cè)試化學(xué),處理要求,檢測(cè)特點(diǎn)存在差異。Promega提供一種*的雙報(bào)告基因技術(shù),結(jié)合了螢火蟲熒光素酶測(cè)試和海洋腔腸熒光素酶測(cè)試。雙熒光素酶報(bào)告基因測(cè)試系統(tǒng),結(jié)合pRL載體系統(tǒng),表達(dá)第二個(gè)報(bào)告基因海洋腔腸熒光素酶,在單管中進(jìn)行雙熒光素酶報(bào)告基因測(cè)試,快速,靈敏,簡(jiǎn)便。系統(tǒng)還提供PLB裂解液,用來裂解在多孔板中培養(yǎng)的哺乳細(xì)胞,不需操作單個(gè)樣品。對(duì)于正在使用螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因載體的研究人員。雙熒光素酶報(bào)告基因測(cè)試系統(tǒng)將使他們立即體會(huì)到該系統(tǒng)的便利。
介 紹
雙報(bào)告基因用于實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中作相關(guān)的或成比例的檢測(cè),通常一個(gè)報(bào)告基因作為內(nèi)對(duì)照,使另一個(gè)報(bào)告基因的檢測(cè)均一化。檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)雙報(bào)告基因通常用來瞬時(shí)轉(zhuǎn)染培養(yǎng)細(xì)胞,帶有實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因的載體共轉(zhuǎn)染帶有不同的報(bào)告基因作為對(duì)照的第二個(gè)載體。通常實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因偶聯(lián)到調(diào)控的啟動(dòng)子, 研究調(diào)控基因的結(jié)構(gòu)和生理基礎(chǔ)。報(bào)告基因表達(dá)活力的相對(duì)改變與偶聯(lián)調(diào)控啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活力的改變相關(guān),偶聯(lián)到組成型啟動(dòng)子的第二個(gè)報(bào)告基因,提供轉(zhuǎn)錄活力的內(nèi)對(duì)照, 使測(cè)試不被實(shí)驗(yàn)條件變化所干擾。
通過這種方法,可減少內(nèi)在的變化因素所削弱的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性,比如,培養(yǎng)細(xì)胞的數(shù)目和活力的差別,細(xì)胞轉(zhuǎn)染和裂解的效率。
使用螢火蟲熒光素酶,結(jié)合*乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT),β-半乳糖苷酶(β-Gal),或葡萄醛酸糖苷酶(GUS)的雙報(bào)告基因,近幾年已普遍使用。但這些雙報(bào)告基因組合削弱了熒光 素酶操作的優(yōu)勢(shì) , 比如熒光素酶測(cè)試和定量可在幾秒鐘內(nèi)進(jìn)行, 但CAT,β-Gal和GUS測(cè)試法, 則在定量前需要長(zhǎng)時(shí)間的保溫。另外,這些報(bào)告基因受限于它們的靈敏度和線性應(yīng)答范圍, 動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒必須注意不要超過這些范圍,內(nèi)源性細(xì)胞活力也會(huì)干擾這類報(bào)告基因的使用。許多類型的細(xì)胞有內(nèi)源β-Gal或GUS表達(dá),不利于準(zhǔn)確定量報(bào)告基因表達(dá), 胞內(nèi)去乙酰酶活力干擾CAT活力測(cè)試。盡管在高溫下預(yù)處理細(xì)胞裂解液,會(huì)降低內(nèi)源性β-Gal和CAT測(cè)試的干擾,但這些處理也會(huì)快速失活熒光素酶。因此,在此類雙報(bào)告基因檢測(cè)中, 必須以不同的步驟分別處理共轉(zhuǎn)染的細(xì)胞裂解液。
Methyl Caprylate 111-11-5 300mg 辛酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Ethyl Ketone 78-93-3 1.2ml×3ampules 2-丁酮¤標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Isobutyl Ketone 108-10-1 1.2ml×3ampules 甲基異丁基甲酮標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Laurate 111-82-0 500mg 月桂酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Linoleate 112-63-0 5×50mg *甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Linolenate 301-00-8 5×50mg 亞麻酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Myristate 124-10-7 300mg 肉豆蔻酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Oleate 112-62-9 500mg 油酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
Methyl Palmitate 112-39-0 300mg 棕櫚酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品
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