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技術(shù)文章

動物血清elisa試劑盒定性檢測規(guī)則

閱讀:104發(fā)布時間:2018-2-8

動物血清elisa試劑盒的結(jié)果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結(jié)果如何判斷呢?公司技術(shù)為您解析: 
間接法和夾心法
這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
陽性判定值 
陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標準。
用此法判斷結(jié)果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
動物血清elisa試劑盒根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用,試劑變質(zhì)和操作不當均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果。
胰蛋白胨水培養(yǎng)基    進口、國產(chǎn)    Peptone Water Medium    250克    用于靛基質(zhì)試驗
菌種保存培養(yǎng)基    進口、國產(chǎn)    Strain Store Medium    250克    常用細菌斜面?zhèn)鞔?br />血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基    進口、國產(chǎn)    Blood Agar Base    250克    供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用
改良羅氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)    進口、國產(chǎn)    L-G Medium Base,Modified    250克    結(jié)核桿菌的培養(yǎng),計數(shù)保存,照光試驗,藥物敏感性測定及菌型鑒定
MiddleBrook 7H10瓊脂    進口、國產(chǎn)    MiddleBrook 7H10 Agar    250克    分枝桿菌的分離培養(yǎng)
MiddleBrook 7H11瓊脂    進口、國產(chǎn)    MiddleBrook 7H11 Agar    250克    分枝桿菌的分離培養(yǎng)
氣單胞菌鑒別瓊脂/Aeromonas Differential Agar    進口、國產(chǎn)    Aeromonas Differential Agar    250克    分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌
動物血清elisa試劑盒

 


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