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技術(shù)文章

其它elisa試劑盒結(jié)果造成假陽性的原因何在

閱讀:113發(fā)布時(shí)間:2017-12-21

技術(shù)明確表明其它elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)樣本要求: 血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測,嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合。超過一周測定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存;使用一次性玻璃試管或真空管*;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值,可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān);EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性;血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的*或于*中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />關(guān)于ELISA結(jié)果造成假陽性的原因我司技術(shù)做出如下原因分析: 
1.樣本嚴(yán)重溶血 ,以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性。
2. 混有紅細(xì)胞的血清沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有細(xì)菌污染 ,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng);
3. 標(biāo)本凝固不全 ,有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測,常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;
4. 其它elisa試劑盒采血試管洗滌不* 、反復(fù)使用易交叉污染; 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
50mg    100188-199701    含量測定    *
50mg    100189-199501    含量測定    *
100mg    100190-200402    UV法溶出檢查    *
50mg    100191-200305    含量測定    *
100mg    100192-200503    含量測定    *
50mg    100193-199601    檢查用    *
100mg    100194-200502    含量測定    *
50mg    100195-199701    含量測定    *
1000mg    100196-200803    GC法含量測定    鄰位甲酚
50mg    100197-201002    檢查用    *
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