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閱讀:72發(fā)布時(shí)間:2017-11-23
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒中有三個(gè)必要的試劑:分別是免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等
完整的ELISA檢測(cè)試劑盒包含以下各組分:
1.已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
2.酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
3.酶的底物;
4.陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
5.結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
6.洗滌液
7.酶反應(yīng)終止液。
ELISA試劑盒操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
(20R)-Protopanaxdiol (20R)-原人參二醇 20mg 7755-01-3
(+)-Bicuculline (+)-荷包牡丹堿; 右旋荷包牡丹堿; 畢枯枯林; 山烏龜堿 20mg 485-49-4
(+)-Catechin hydrate (+)-兒茶素水合物 20mg 225937-10-0
(+)-Gallocatechin (+)-棓兒茶酸 20mg 970-73-0
(+)-Praeruptorin A (+)-白花前胡甲素 20mg 73069-27-9
(-)-Asarinin (-)-細(xì)辛脂素 20mg 133-04-0
(-)-Huperzine A (-)-* 20mg 102518-79-6
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒
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