使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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PCR的反應(yīng)條件：
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小，設(shè)定25～30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會(huì)出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時(shí)，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時(shí), 時(shí)間設(shè)定可稍長(zhǎng)一些。通常，Anneal溫度太高，有時(shí)會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時(shí)，容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外，Extension時(shí)間太短時(shí)，會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會(huì)有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時(shí)間太長(zhǎng)時(shí)，會(huì)出現(xiàn)Smear。
(1S,2S)-2-(二苯基膦)環(huán)己胺 97%Geniposide；京尼平苷/梔子苷柴胡顆粒Rat N-MID-OT(N-MID Osteocalcin) ELISA Kit

Rat Hepc 25(Hepcidin 25) ELISA Kit

(1S,2S)-(-)-1, 2－二苯基－1, 2－二胺 98%Potassium sorbate；山梨酸鉀饅頭改良劑Rat Estrogen ELISA Kit

Rat Estrone(Estrone) ELISA Kit

(1S,2S)-N-(對(duì)苯磺酰)-1,2-二苯基二胺 98%Senegenin；遠(yuǎn)志皂苷元五香粉Rat E2(Estradiol) ELISA Kit

Rat HCY(Homocysteine) ELISA Kit

(1S,2S)-(+)-N,N'-二基環(huán)己烷-1,2-二胺 98%Leonurine hydrochloride；鹽酸益母草堿咖喱粉Rat GAGs(Glycosaminoglycan) ELISA Kit

Rat TGFBR1(TGF-beta receptor type-1) ELISA Kit

(1S,2S)-(-)-1,2-環(huán)己二胺D-鹽 98%Econazole nitrate；硝酸益康唑白胡椒粉Rat TGFBR2(TGF-beta receptor type-2) ELISA Kit

Rat DCP(Des-gamma carboxyprothrombin) ELISA Kit

(S,S)-2,6-雙(4-異基-2-惡唑啉-2-基)吡啶 99%Bisdemethoxycurcumin；雙去氧基姜黃素復(fù)配肉制品水分保持劑Rat FBXO32(F-box only protein 32) ELISA Kit

Rat 3-MH(3-methylhistidine) ELISA Kit

(S,S)-N-(對(duì)苯磺酰)-1,2-二苯烷二胺(對(duì)異基苯)釕(II) Butylated Hydroxyanisole/BHA；基羥基茴香醚復(fù)配肉制品水分保持劑Rat MTOR(Serine/threonine-protein kinase Mtor) ELISA Kit

Rat MTL5(Tesmin) ELISA Kit

二酰基[(S)-(-)-2,2'-雙(二-P-苯基酰)-1,1'聯(lián)萘]釕 95%Neoagarohexaose；新瓊六糖三黃散Rat CK-18/KRT18(CytokeRatin 18) ELISA Kit

Rat ENK(enkephalin) ELISA Kit

2,2′:6′,2′′-三吡啶 98%Doxorubicin hydrochloride；鹽酸阿霉素情散Rat IL1RL1(IL-1 Receptor Like 1) ELISA Kit

Rat CTRP15(Complement C1q tumor necrosis factor-related protein 15) ELISA Kit

三基 97%Kanamycin mono sulfate；硫酸卡那霉素冰糖雪梨香精Rat Acan(Aggrecan core protein) ELISA Kit

Rat AP12(Apelin 12) ELISA Kit
天南星染料法PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)β-肌動(dòng)蛋白抗體納米鐵粉 99.9%，50nm2-[(三(羥基)基)]-1-磺酸鈉pUNO1-hTRAILa

促腎上腺皮質(zhì)激素抗體納米鐵粉 99.9%，80nmTris磺酸pUNO1-hTRAM

肌動(dòng)蛋白α抗體苯酮 GCS,≥99.5% (GC)地霉素pUNO1-hTRANCEa

神經(jīng)絲蛋白抗體銨 AR,99.0%松油醇pUNO1-hTRANCEb

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型1--2-萘酚-4-磺酸 ACS reagent, ≥98%三基酸鹽pUNO1-hTREM1

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7茜素絡(luò)合指示劑 高純級(jí),98%四甘醇pUNO1-hTREM2

內(nèi)收蛋白抗體茜素絡(luò)合指示劑 Indicator三撐二胺pUNO1-hTREML2

脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體烯腈 Standard for GC(劇)硬脂酸酯pUNO1-hTREML4

脂聯(lián)素受體-1抗體鄰苯酸 Standard for GC, ≥99.5% (GC)基三銨pUNO1-hTREX1a

脂聯(lián)素受體-2抗體1,4-炔二醇  Standard for GC, ≥99.5% (GC)四銨pUNO1-hTRIAD3a
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，Z后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR