當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR試劑盒>>PCR鑒定試劑盒>> 50次兒茶染料法PCR鑒定試劑盒價格 基因擴(kuò)增儀
適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測,如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:兒茶染料法PCR鑒定試劑盒價格
英文名稱:Catechu
貨號:YSP8656
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
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實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
鋇標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,基體: 5%HCl 4-溴-3-基酰苯胺非離子聚烯酰胺Human PDE4D(Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit
Human PDGF(Plaet-Derived Growth Factor) ELISA Kit
鈹標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml 3-氯-4-氧基-2-氟苯硼酸COD去除劑Human PDGF-AA(Plaet Derived Growth Factor-AA) ELISA Kit
Human PDGFRβ(Plaet Derived Growth Factor Receptor Beta) ELISA Kit
苯標(biāo)準(zhǔn)溶液0.96mg/ml,溶劑:醇 1-溴-3-氯-4-氧基-2-氟苯水飛薊素Human PDH E1(Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA Kit
Human PDHα(Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit
生化需氧量(BOD)標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml 4,6-二氧基-2-巰基嘧啶泰妙菌素(截短側(cè)耳素)Human PDHβ(Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit
Human PDI(Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit
氣相色譜儀檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(苯-苯溶液)5.03mg/ml,基體:苯 2-基-5-嘧啶醛酞菁藍(lán)Human PDIA2(Protein Disulfide Isomerase A2) ELISA Kit
Human PDIA3(Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit
五日生化需氧量標(biāo)準(zhǔn)品1000mg/L 2-基巰基嘧啶-5-醛覆盆子酮Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit
Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit
水質(zhì)生化需氧量標(biāo)樣 濃度范圍:61.8-148(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品 4-溴苯酰苯人參皂苷Rh2Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit
Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit
苯并(b)熒蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液 10~100μg/mL,基體:醇 2-溴-3-氨基-5-氯吡啶小球藻粉Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit
Human PF4V1(Plaet Factor 4 Variant 1) ELISA Kit
苯并(k)熒蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液 4.38ug/ml,基體:醇 4-(2-吡啶基)苯硼酸頻哪醇酯(1R,2S)-REL-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)胺鹽酸鹽Human PFKM(Phosphofructokinase, Muscle) ELISA Kit
Human PFKP(Phosphofructokinase, Plaet) ELISA Kit
苯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/ml,基體:石油醚 (3-羥基-4-氧基苯基)硼酸5’-呈味核苷酸二鈉Human PGAM1(PhosphoglyceRate Mutase 1) ELISA Kit
Human PGD2S(Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit
兒茶染料法PCR鑒定試劑盒價格 變色酸2-基-4-硝基氧化吡啶 98%美菱冰箱 BCD-201MLT 201升 兩門
Anthranilyl-HIV Protease Substrate VI
苦酮酸間三氟基苯酸酯 99%車德克(CEDEKE)DK-3100 多功能10M海藍(lán)水管全銅接頭洗車水槍套Anthranilyl-HIV Protease Substrate V
味酸4-哌啶酮鹽酸鹽,水合 98%上門維修費用Anthranilyl-HIV Protease Substrate IV
溴酚蘭鈉鹽4-氨基三氟苯 98%五氧二銻 99%Anthranilyl-HIV Protease Substrate III
橙黃I鄰三氟基苯醛 98%硫化銻 98%Anthranilyl-HIV Protease Substrate
芐橙3-(三氟基)苯酰氯 98%吡螨胺 分析標(biāo)準(zhǔn)品Ac-TVSFNF
煌橙4-(三氟基)苯醛 96%吡螨胺Ac-TLNF-OH
喹哪啶紅4-(三氟基)苯酚 97%硬脂酸鋅 Zn 10-12%,200目Ac-SQNY-OH
赤蘚紅3-三氟基苯酸 98%磺胺吡啶 98%Histatin-8
莧菜紅四吡喃酮 97%3-溴酮酸酯 90%Histatin-5
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論
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