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服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 兔環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rabbit cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit |
貨號 | YS-R9560 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Alexa Fluor 350標記的小鼠抗人IgM 0.1mlMouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350
Cy7標記的小鼠抗牛IgG 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/Cy7
堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗生物素抗體IgG 0.1mlRabbit Anti-Biotin/AP
羅丹明標記的兔抗狗IgG 0.3mlRabbit Anti-dog IgG/RBITC
PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgG 0.1mlRabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7
FITC標記的兔抗人分泌型IgA 100ugRabbit Anti-human sIgA/FITC
PE-CY5標記的兔抗小鼠IgG 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG/PE-CY5
Cy5標記的兔抗豬IgG 0.1mlRabbit Anti-pig IgG/Cy5
PE標記的驢抗兔IgG 0.1mlDonkey Anti-rabbit IgG/PE
牛血清白蛋白(標準) 1mgBSA(標準)
辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP
促腎上皮質激素釋放因子 0.5mgCRF (Corticotropin-Releasing Factor)
胰島素(抗原) 0.5mgIsulin
一氧化氮合成酶-1(抗原) 0.5mgNOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1)
兔環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒當藥寧;Swertianin 20882-75-1 規(guī)格: 20mg
黨參炔苷;Lobetyolin 136085-37-5 規(guī)格: 10mg
赤松素;Pisylvin 22139-77-1 規(guī)格: 20mg
橙黃Ⅱ;Orange Ⅱ 633-96-5 規(guī)格: 20mg
扁桃酸;Mandelic acid 611-71-2 規(guī)格: 100mg
白術內酯Ⅱ;Atractylelid 73069-14-4 規(guī)格: 20mg
澳洲茄胺;solasodine 126-17-0 規(guī)格: 20mg
吡禾靈;純品型;標準品;有證書 69806-34-4 規(guī)格: 0.25g
綠麥隆;純品型;標準品;有證書 15545-48-9 規(guī)格: 0.1g
2.4-D丁酯;純品型;標準品;有證書 94-80-4 規(guī)格: 0.1g
除草;純品型;標準品;有證書 1836-75-5 規(guī)格: 0.1g
地克松;純品型;標準品;有證書 140-56-7 規(guī)格: 0.1g
甲氧酰肼;純品型;標準品;;有證書 161050-58-4 規(guī)格: 0.1g
苯;純品型;標準品;有證書 39515-40-7 規(guī)格: 0.1g
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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