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操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rabbit anti brain tissue antibody (ABAb) ELISA Kit |
貨號 | YS-R9566 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子 96TPAI ELISA Kit
人抗肌動蛋白抗體 96TAAA(Human anti-Actin antibody) ELISA Kit
小鼠白介素1 96TIL-1(Mouse Interleukin 1) ELISA Kit
大鼠腫瘤壞死因子β 96TTNF- Beta ELISA Kit
人大皰性類天皰瘡抗體 96TBP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit
大鼠前心鈉肽 96TPro-ANP ELISA Kit
人反三碘甲狀原氨酸 96TrT3(Human ReverseTri-iodothyronine) ELISA Kit
大鼠穿孔素 96TPF/PFP(Rat Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit
人總前列特異抗原 96TtPSA(Human total prostate s pecific antigen) ELISA Kit
人骨形成蛋白6 96TBMP-6(Human Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit
人環(huán)磷酸苷 96TcAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit
人白介素受體相關(guān)激酶 96TIRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit
人鳥氨酸脫羧酶 96TODC(Human Ornithine decarboxylase) ELISA Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B 96TMMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit
兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA檢測試劑盒水飛薊賓 22888-70-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
槲皮素 117-39-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
穿心蓮內(nèi)酯 5508-58-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
維生素A乙酸酯 127-47-9 規(guī)格: 20mg
金剛烷醇 700-57-2 規(guī)格: 20mg
升醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷 27994-11-2 規(guī)格: 10mg
芝素 607-80-7 規(guī)格: 20mg
原堿 130-86-9 規(guī)格: 20mg
小白菊內(nèi)酯 20554-84-1 規(guī)格: 20mg
太子參環(huán)肽B 規(guī)格: 10mg
穗花杉雙黃 1617-53-4 規(guī)格: 20mg
人參皂苷F1 53963-43-2 規(guī)格: 20mg
去氫荷包牡丹堿 規(guī)格: 10mg
毛萼結(jié)甲(95%) 規(guī)格: 20mg
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