當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研抗體>>一抗>> 0.2ml/200μgAnti-PHKB抗體
產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 | 中文名稱 | 磷酸化酶β抗體 |
規(guī)格 | 0.2ml/200μg | 貨號 | YSRIBIO-018825 |
中文名稱 磷酸化酶β抗體
英文名稱 Anti-PHKB
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 124kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PHKB
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
別 名 Phosphorylase B; Phosphorylase kinase B; Phosphorylase kinase beta polypeptide; Phosphorylase kinase beta subunit; DKFZp781E15103; FLJ41698; KPBB_HUMAN.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.2ml/200μg |
貨號 | YSRIBIO-018825 |
抗體的熒光標記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳suan氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
2-(氯甲基)吡啶鹽鹽 98%溶菌檢測試劑盒
吡啶-3-甲 98%肉檢測試劑盒
氟化鈉 AR,98%狀腺原氨檢測試劑盒
N,N-二乙基-2-甲基-1,4-苯二鹽鹽 99%神經(jīng)疾病靶標酯檢測試劑盒
5-溴-2-糖 98%神經(jīng)絲蛋白檢測試劑盒
1,3-二甲基 99%神經(jīng)元烯化檢測試劑盒
2,6-二氨基吡啶 98%腎上腺檢測試劑盒
阿魏 99%生長激檢測試劑盒
阿魏 分析標準品,≥99.5%(HPLC)生長抑檢測試劑盒
四氮唑 98%瘦檢測試劑盒
植鈣 Ca: 20.0 ~ 24.0 %髓過氧化物檢測試劑盒
苯甲二甲基縮 98%髓鞘性蛋白抗體檢測試劑盒
苯甲二甲基縮 ≥98%,Kosher髓樣分化因子88檢測試劑盒
3,4-己二酮 96%,FCC糖皮質(zhì)激檢測試劑盒
烯硫 50%銅藍蛋白檢測試劑盒
Anti-PHKB抗體DR4/APO2/TRAILR1 (Death receptor 4) 死亡受體4抗原
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 腫瘤調(diào)亡/死亡受體5抗原
DP-I/DSP(desmoplakin I ) 橋粒斑蛋白1抗原
DVL1 (dishevelled 1) 蓬亂蛋白1
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥三磷-發(fā)動蛋白2抗體
Nadrin peptide 發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白多肽抗原
E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1
E2F2
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