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服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Mouse endothelin (Big ET) ELISA Kit |
貨號 | YS-M9934 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷酸化膀胱癌缺失基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-DBC1 (Tyr454)
Dab2相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:DAB2IP
二氫葉酸還原酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:DHFR
磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-EphB1 (Tyr928)
內(nèi)皮細胞活化蛋白受體抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:EPCR
雌激素受體相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Estrogen Related Receptor gamma
磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104 + Ser106)
EFHC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:EFHC1
大腸桿菌脂多糖抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:E. coli LPS
細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:ELK1
髓鞘缺陷相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:FAM126A
鋅指蛋白FYCO1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:FYCO1
FAM161B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:FAM161B
叉頭蛋白D1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:FOXD1
小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA檢測試劑盒酸黃連堿 1198398-71-8 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
擬人參皂苷F11 69884-00-0 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
升醇-3-O-α-L-拉伯糖苷 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支
大豆苷 552-66-9 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
4-去甲氧基表鬼臼素 6559-91-7 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
去 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
異歐前胡素 482-45-1 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
羽扇豆醇 545-47-1 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
路路通酸 4481-62-3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支
石榴甙;石榴苷 65995-63-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
桃葉珊瑚苷;杜仲苷 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黃柏堿 104112-82-5 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
原花青素 規(guī)格: UV≥95%,20mg/支
龍膽(堅龍膽) 對照品 規(guī)格: 0.5g
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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