實驗操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

公司向您推薦Primarker™人腎上皮細(xì)胞鑒定試劑盒的詳細(xì)說明：

細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長特性，在適當(dāng)?shù)臅r候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

添加劑琥珀酸比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織多聚ADP核糖聚合酶－1（PARP-1）活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

植物源性食品小麥（wheat）基因檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞己糖激酶（HEXOKINASE）酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

二酯酶8A（Phosphodiesterase 8A） 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：0.25單位

細(xì)菌氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次

動物細(xì)胞/組織甘露糖6-異構(gòu)酶（mannose－6－phosphate isomerase；MPI）電泳分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次

凝血酶原時間（PT）檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

沉淀法去內(nèi)毒素試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

血3-甘油醛脫氫酶（GAPDH）活性酶動力比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)菌細(xì)胞趨化作用（chemotaxis）軟瓊脂檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次

Primarker™人腎上皮細(xì)胞鑒定試劑盒3-(甲)甲分子式：121.18英文名稱：3- (Jia Anji) toluene號：696-44-6分子量： C8H11N

羅卡因英文名稱：Ropivacaine hydrochloride分子式：310.86分子量： C17H27ClN2O號：98717-15-8

4--2-氟三氟甲分子式：179.12英文名稱：4- amino -2- fluoride three f號：69411-68-3分子量： C7H5F4N

3-(三氟甲)分子式：153.15英文名稱：3- (three fluorine methyl piperidine)號：768-31-0分子量： C6H10F3N

2-甲呋分子式：82.1英文名稱：2- methyl group號：534-22-5分子量： C5H6O

間二(三氟甲)分子式：214.11英文名稱：Between two (three f) benzene號：402-31-3分子量： C8H4F6

變色英文名稱：Discoloration acid分子式：320.3分子量： C10H8O8S2號：148-25-4

泛昔洛韋英文名稱：Famciclovir分子式：321.33分子量： C14H19N5O4號：104227-87-4

天門冬氨洛美沙星英文名稱：Lomefloxacin aspartate分子式：484.453分子量： C17H19F2N3O3.C4號：211690-33-4

格列美脲英文名稱：Glimepiride分子式：490.62分子量： C24H34N4O5S號：93479-97-1

克拉霉素英文名稱：Clarithromycin分子式：747.95分子量： C38H69NO13號：81103-11-9

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。