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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human soluble phospholipase A2 (sPL-A2) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-H11653 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:NEK1
外致密纖維蛋白3B抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:ODF3B
神經(jīng)叢蛋白B1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Plexin B1
苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:PACAP-38
p21激活激酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:PAK1
p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:P21
酸性核磷蛋白32家族B抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PHAPI2
原鈣粘附蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PCDH1
磷酸化蛋白激酶C theta抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-PRKCQ(Thr538)
組蛋白精氨酸轉(zhuǎn)移酶CARM1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PRMT4
磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-PEA15 (Ser104)
泌乳素受體抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PRLR
前列素F2a/PGF2 α抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PGF2 alpha
磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-p90RSK (Ser380)
人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA檢測試劑盒小鼠凝血因子Ⅱ(F2)ELISA試劑盒 英文名: F2 ELISA Kit
小鼠凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)ELISA試劑盒 英文名: TAT ELISA Kit
小鼠凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒 英文名: GS ELISA Kit
小鼠鎳紋蛋白(METRN)ELISA試劑盒 英文名: METRN ELISA Kit
小鼠尿調(diào)蛋白(UMOD)ELISA試劑盒 英文名: UMOD ELISA Kit
小鼠尿皮質(zhì)素3(UCN3)ELISA試劑盒 英文名: UCN3 ELISA Kit
小鼠尿皮質(zhì)素2(UCN2)ELISA試劑盒 英文名: UCN2 ELISA Kit
小鼠尿皮質(zhì)素1(UCN1)ELISA試劑盒 英文名: UCN1 ELISA Kit
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA試劑盒 英文名: uPAR ELISA Kit
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒 英文名: uPA ELISA Kit
小鼠鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A)ELISA試劑盒 英文名: GUCA2A ELISA Kit
小鼠鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒 英文名: ODC ELISA Kit
小鼠黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA試劑盒 英文名: MAdCAM1 ELISA Kit
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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