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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human thioredoxin (Trx) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11791 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人硫酸褪黑色素 96TMS(Human melatonin sulfate) ELISA Kit
人血栓素B2 96TTXB2(Human Thromboxane B2) ELISA Kit
人硒蛋白1 96TSEP1(Human selenoprotein 1) ELISA Kit
人葉酸 96TFA(Human Folic acid) ELISA Kit
人二氫嘧啶酶樣2 96TDPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit
人葡萄糖氧化酶 96TGOD(Human glucose oxidase) ELISA Kit
人肌球蛋白輕鏈激酶 96TMLCK(Human myosin light chain kinase) ELISA Kit
人抗類風濕關節(jié)炎核抗原 96TRANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit
人血管生長素 96TANG(Human Angiogenin) ELISA Kit
人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質抗體 96TPR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit
人維生素D2 96TVD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit
人B細胞受體 96TBCR(Human B cell receptor) ELISA Kit
人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1 96THuman thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit
人甲狀旁激素樣蛋白 96THuman parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit
人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA檢測試劑盒小鼠Lin-28同源物A(LIN28A)ELISA試劑盒 英文名: LIN28A ELISA Kit
小鼠L1-細胞粘附分子(L1CAM)ELISA試劑盒 英文名: L1CAM ELISA Kit
小鼠Kruppel樣因子1(KLF1)ELISA試劑盒 英文名: KLF1 ELISA Kit
小鼠Klothoβ蛋白(KLβ)ELISA試劑盒 英文名: KLβ ELISA Kit
小鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒 英文名: Ki67P ELISA Kit
小鼠Jun小鼠B原癌基因(JUNB)ELISA試劑盒 英文名: JUNB ELISA Kit
小鼠Jagged小鼠1蛋白(JAG1)ELISA試劑盒 英文名: JAG1 ELISA Kit
小鼠IL2誘導T細胞激酶(ITK)ELISA試劑盒 英文名: ITK ELISA Kit
小鼠IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA試劑盒 英文名: FcεRⅡ ELISA Kit
小鼠G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)ELISA試劑盒 英文名: GPR120 ELISA Kit
小鼠G蛋白偶聯(lián)雌激素受體1(GPER)ELISA試劑盒 英文名: GPER ELISA Kit
小鼠G蛋白β1(GNβ1)ELISA試劑盒 英文名: GNβ1 ELISA Kit
小鼠Gremlin小鼠1蛋白(GREM1)ELISA試劑盒 英文名: GREM1 ELISA Kit
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