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倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Type III procollagen peptides in rats (P III NP) ELISA Kit |
貨號 | YS-T10711 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
非洲防己堿;Columbamine 3621-36-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
二氫醉椒苫素 ;dihydrometh 19902-91-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
DL-丁香樹脂酚;DL-Syringar 1177-14-6 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
大黃酸;Rhein 478-43-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
次黃嘌呤;6-Hydroxypurine 68-94-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
刺芒柄花素;Formonetin 485-72-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
;Phenylacetic aci 103-82-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
表兒茶素;L-Epicatechin 490-46-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
磺胺噻唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 72-14-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.25g
解喹;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 99607-70-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
草定;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 97886-45-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
硝胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 99-30-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
蕓苔素內(nèi)酯;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 72962-43-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
吡丙;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 95737-68-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA檢測試劑盒大鼠膀胱上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
土星孢青霉 Eupenicillium saturniforme短梗青霉 Penicillium brevistipitatum
馬克斯克魯維酵母 Kluyceromyces marxianus根瘤菌
Hepa 1-6(小鼠肝細(xì)胞)SP Rabbit & Mouse HRP Kit、兔/鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
純白鏈霉菌 Streptomyces candidus香菇 Lentinula edodes
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基人髓性紅白血病細(xì)胞
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis香菇 Lactarius camphoratus
蘋果黑腐皮殼BABL/C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
小鼠畸胎瘤細(xì)胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基紫紅曲霉 Monascus purpureus
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus人骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna786-O [786-0], 人腎透腺細(xì)胞
TSCCa(人舌鱗細(xì)胞)鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
糖丁酸梭菌 Clostridium saccharobutyricum蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiTE-10(人食管細(xì)胞)
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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