公司向您推薦Primarker™人肺大動脈平滑肌細(xì)胞鑒定試劑盒的詳細(xì)說明：

細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長特性，在適當(dāng)?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
?
實驗操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

活體細(xì)胞脘蛋白去糖基化試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

食品三聚胺快速顯色定性檢測試劑盒（家用型/工業(yè)型） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20/200次

人體HLA-A（EXON2）RFLP基因分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

1摩爾DTT 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：1毫升

TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測試劑盒（含AP一抗） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次

冰凍切片衰老特異性β-半糖苷酶原位染色試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次

血谷胱甘肽過氧化物酶（GSH PX）活性酶動力比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞組織型纖維蛋白溶酶原激活劑（tPA）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

血谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSH ST）總活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

冰凍切片組織BAD蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

組織對氧磷酶1（PON1）內(nèi)酯酶活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：

PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：25次

Primarker™人肺大動脈平滑肌細(xì)胞鑒定試劑盒光甘草定英文名稱：Light licorice分子式：324.37分子量：C20H20O4號：59870-68-7

2-甲乙英文名稱：2- methyl styrene分子式：118.18分子量： C9H10號：611-15-4

Ε(1-萘酚-3,8-二磺納)英文名稱：Epsilon acid (1- two -3,8- naphthol sulfonic acid sodium)分子式：348.26分子量： C10H6Na2O7S2號：83732-80-3

1-溴-三氟對二甲分子式：239.03英文名稱：1- - bromine three fluorine xylene號：402-49-3分子量： C8H6BrF3

5,6-二甲并咪唑分子式：146.19英文名稱：5,6- two methyl benzimidazole號：582-60-5分子量： C9H10N2

4--6-羥-2-巰嘧分子式：161.18英文名稱：4- amino -6- hydroxy -2-號：65802-56-4分子量： C4H5N3OS.H2O

2-氯-3-甲吡分子式：127.57英文名稱：2- -3- methyl pyridine號：18368-76-8分子量： C6H6ClN

9-芐咔唑分子式：257.34英文名稱：9- benzyl carbazole號：19402-87-0分子量： C19H15N

3-正-己硫代-1,2,4-三唑分子式：185.29英文名稱：3- is -1,2,4- three - cyclohexyl thio triazole號：74682-60-3分子量： C8H15N3S

間溴三氟甲分子式：225.01英文名稱：Between three fluorine toluene號：401-78-5分子量： C7H4BrF3

(1R,2R)-N,N'-雙(2-乙酰-3-氧代-2-亞丁)-1,2-二均*乙二胺合鈷分子式：573.6英文名稱：(1R, 2R) -N, N'- (2- - acetyl -3- oxo -2- Ding Xiji) -1,2- two three tolyl ethylenediaminecobalt號：361346-80-7分子量： C32H38CoN2O4

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。