實驗操作步驟：
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

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細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長特性，在適當?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

植物蛋白巰基/結合巰基含量熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

組織二酯酶3（PDE3）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10次

 細胞INSULIN 蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10/50 次

通用型蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

細胞3－羥－3－甲戊二酰輔酶A（HMG－COA）還原酶活性間接比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

石蠟切片組織COLLAGEN I蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10/20次

體非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

組織脫氫酶3活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

ANDROGEN RECEPTOR 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進口/國產 規(guī)格：5次

組織抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

血脫氫酶1活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

IGF 蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：25次

Primarker™人肺成纖維細胞鑒定試劑盒價格氯木蘭花堿英文名稱：Chlorinated Magnolia分子式：377.86186分子量：C20H24ClNO4號：

二十九英文名稱：Twenty-nine acid分子式：分子量：號：

孔雀石綠英文名稱：Malachite green分子式：927.01分子量： C52H54N4O12號：2437-29-8

2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲二鈉(BCA)英文名稱：2,2- two sodium benzoate (BCA), -4,4- two分子式：388.28分子量： C20H10N2Na2O4號：979-88-4

油酸鉀分子式：320.55英文名稱：Oleic acid potassium號：143-18-0分子量： C18H33KO2

柳氮磺胺吡分子式：398.39英文名稱：Liu n號：599-79-1分子量： C18H14N4O5S

3,5-二氯-2-吡分子式：173英文名稱：3,5- two chloride -2-號：85331-33-5分子量： C6H2Cl2N2

2,5-二(4-)惡二唑分子式：252.28英文名稱：2,5- two (4- amino phenyl) two號：2425-95-8分子量： C14H12N4O

5--3-(4-甲)吡唑分子式：173.21英文名稱：5- amino -3- (4- methyl group)號：78597-54-3分子量： C10H11N3

溴鋁分子式：266.69英文名稱：Aluminium bromide號：7727-15-3分子量： AlBr3

N-(2-溴)咔唑分子式：321.21英文名稱：N- (2- Bromophenyl) carbazole號：902518-11-0分子量： C19H13Br

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。