公司向您推薦Primarker™人小腸平滑肌細胞鑒定試劑盒規(guī)格的詳細說明：

細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據細胞生長特性，在適當的時候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
?
實驗操作步驟：
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

牛體細胞總蛋白酶分離試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

細菌a-淀粉酶（a-AMYLASE）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

載玻片細胞線粒體復合物I蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10/20次

體葡萄糖氧化酶比色法定量檢測試劑盒  進口/國產 規(guī)格：20次

組織半胱氨酸蛋白酶-13（PASE-13）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

 TNF BETA蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產 規(guī)格：5次

調料甲酸比色法定量檢測試劑盒  進口/國產 規(guī)格：20次

細胞半胱氨酸蛋白酶-9（PASE-9）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

TNF ALPHA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進口/國產 規(guī)格：5次

通用型牛病毒性腹瀉病毒II型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -2；BVDV-2）定量PCR擴增檢測試劑盒    進口/國產 規(guī)格：20次

組織半胱氨酸蛋白酶-6（PASE-6）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

MYC蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：25次

Primarker™人小腸平滑肌細胞鑒定試劑盒規(guī)格羥積雪草苷英文名稱：Hydroxy group分子式：975.12092分子量：C48H78O20號：34540-22-2

異煙英文名稱：ISO nicotinic acid分子式：123.11分子量： C6H5NO2號：55-22-1

勞氏紫英文名稱：Thionine分子式：263.7459分子量： C12H10ClN3S號：581-64-6

6-溴-2-甲喹啉分子式：222.09英文名稱：6- -2- methyl bromide號：877-42-9分子量： C10H8BrN

N-三氟乙酰咪唑分子式：164.09英文名稱：N- three acetyl group號：1546-79-8分子量： C5H3F3N2O

吖分子式：179.22英文名稱：Acridine號：260-94-6分子量： C13H9N

6-甲-2-吡甲分子式：123.15英文名稱：6- methyl -2- pyridine based 號：1122-71-0分子量： C7H9NO

1,3-二環(huán)己氯咪唑分子式：268.83英文名稱：1,3- dicyclohexyl imidazole chloride號：181422-72-0分子量： C15H25ClN2

2-氟吡分子式：97.09英文名稱：2- f號：372-48-5分子量： C5H4FN

3-羥-2-硝吡分子式：140.1英文名稱：3- hydroxy -2- nitro pyridine號：15128-82-2分子量： C5H4N2O3

氘代-d6分子式：84.15英文名稱：Deuterium substituted benzene -d6號：1076-43-3分子量： C6D6

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。