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服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠抗IgE受體抗體ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat anti IgE receptor antibody ELISA Kit |
貨號 | YS-R11971 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
表沒食子兒茶素 970-74-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
胡屬苷 117479-87-5 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
牛蒡苷元; 牛蒡子苷元 7770-78-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黃連堿 3486-66-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
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新穿心蓮內(nèi)酯 27215-14-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
益母草堿 24697-74-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
常春藤皂苷元; 常春藤皂甙元 465-99-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
巖白菜素 477-90-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
三七皂苷Ft1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
28-去-β-香樹脂 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支
蘆丁;蕓香苷;蕓香葉苷;維生素P;蘆丁蕓 153-18-4 訂購|咨詢 規(guī)格: UV≥98%,20mg/支
博落回總堿 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg
比林 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg;99.9%
(酸)慶大-小諾 標(biāo)準(zhǔn)品 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg
大鼠抗IgE受體抗體ELISA檢測試劑盒P19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)人肝細(xì)胞
植物桿菌 Lactobacillus plantarumSK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞
雙孢蘑菇鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
小鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基SF763(人腦瘤細(xì)胞)
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
香菇 Lentinula edodes頂孢霉 Cephalosporium acremonium
801-D (人巨細(xì)胞性肺細(xì)胞)恒河猴腎細(xì)胞
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus 細(xì)胞名稱
苜蓿中華根瘤菌凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans
RL95-2(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
繩狀青霉 Penicillium funiculosumHela S3(人宮頸細(xì)胞)
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti三硝基苯硝胺梭菌 Clostridium tetryl
人前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基灰色鏈霉菌 Streptomyces griseus
細(xì)胞名稱大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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