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人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human cytokeratin 20 (CK-20) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12388 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1mlRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 647
Cy7標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1mlRabbit anti-MG IgG/Cy7
Cy7標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy7
牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白12 0.5mgGLUT12
內(nèi)皮素-1(抗原) 0.5mgEndothelin-1 (ET-1)
胰島素受體底物-2(抗原) 0.5mgIRS-2
丁酰膽堿脂酶抗原(C端) 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT
膠質(zhì)細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(多肽) 0.5mgTmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2)
CD40L抗原 0.5mgCD40L(CD40 Ligand/TNFSF5/CD154)
降鈣素受體樣蛋白抗原 0.5mgCRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor)
紅細胞生成素受體抗原 0.5mgEPOR peptide
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗原(熱休克蛋白70蛋白5) 0.5mgGRP78(glucose regulated protein 78)
白介素16抗原 0.5mgIL-16(Interleukin-16)
人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA檢測試劑盒矮地茶 規(guī)格: 1g
α-蒎烯 規(guī)格: 0.1ml
膽鹽乳糖對照培養(yǎng)基 規(guī)格: 3.6g/100ml
黃芪甲苷 84687-43-4 規(guī)格: 20mg
五指毛桃 規(guī)格: 1g
左旋多巴 59-92-7 規(guī)格: 50mg
祖師 規(guī)格: 3g
格列美脲雜質(zhì)2 規(guī)格: 50mg
加 17902-23-7 規(guī)格: 50mg
葉酸 59-30-3 規(guī)格: 100mg
醇二葡萄糖苷 規(guī)格: 20mg
瓜子金皂苷己 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
圣草次苷; 圣草次甙 13463-28-0 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黃花敗醬甙C;牡丹草苷B 17233-22-6 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg/支
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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