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倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Guinea pig endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit |
貨號 | YS-G9533 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
桑色素;桑黃素 480-16-0;654055-01-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
光萼野百合堿(光萼豬屎豆堿;烏拉明) 15503-87-4 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
白藜蘆醇 501-36-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
可可堿 83-67-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥99%,20mg/支
根皮苷 60-81-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥99%,20mg/支
水飛薊賓;水飛薊素;利馬林;2,3-二 22888-70-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黃芪甲苷 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 25mg;94.4%
洛美星 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg;98.6%
延胡索酸泰妙菌素 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg;99.4%
紫莖女貞苷B;Ligupurpurosi 147396-02-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
2-乙酰基洋丁香酚苷;2-Acetyla 94492-24-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
乙氧基白屈菜紅堿; 5-Ethoxych 79559-55-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
亞酸;Gamma lilenic 506-26-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
7-乙基-10-羥基喜樹堿;7-Ethy 86639-52-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
異去氫鉤藤堿;Isocoryxein 51014-29-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA檢測試劑盒蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細胞*培養(yǎng)基JEG-3(人絨毛膜細胞)
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes尖孢鐮刀菌棉花?;?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
786-O(人腎透細胞細胞)低分化胃
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
苜蓿中華根瘤菌杯形禿馬勃 Calvatia cyathiformis
RL1(大鼠肺成纖維樣細胞)小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基
圣堡羅沙門氏菌 Salmonella saintpaul人腎成纖維細胞*培養(yǎng)基
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基大腸桿菌 Escherichia coli
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae串珠菌 Leuconostoc lactis
臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
小鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基MDA-MB-231(人腺細胞)
彎曲桿菌 Lactobacillus curvatus神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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