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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA檢測(cè)試劑盒>>人ELISA檢測(cè)試劑盒>> 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA檢測(cè)試劑盒
人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測(cè)試劑盒
人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA檢測(cè)試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-H11236 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
剪接體相關(guān)蛋白62抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SAP62
垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Securin
鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SDHB
小鼠抗牛IgG 1mgMouse Anti-Bov IgG
Cy5.5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1mlDog IgM/Cy5.5
Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1mlMouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 555
PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-CY5
APC標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/APC
PE標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1mlGoat Anti-Guinea pig IgG/PE
辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1mlMouse Anti-human IgG/HRP
Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1mlMouse Anti-Rabbit IgM/Cy5
PE標(biāo)記的兔抗親和素 0.1mlRabbit Anti-Avidin/PE
PE標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/PE
Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1mlRabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 350
人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA檢測(cè)試劑盒2 ug pSG1154 pSG1154 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pSH47 pSH47 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pSH63 pSH63 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pShooter pShooter 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pSHE-GFP pSHE-GFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pShuttle pShuttle 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pShuttle-CMV pShuttle-CMV 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pSG5 pSG5 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pShuttle-EGFP-C pShuttle-EGFP-C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pShuttle-IRES-hrGFP-1 pShuttle-IRES-hrGFP-1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pShuttle-IRES-hrGFP-2 pShuttle-IRES-hrGFP-2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pSI pSI 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug psiCHECK-2 psiCHECK-2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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