當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>ELISA檢測試劑盒>>大鼠ELISA檢測試劑盒>> 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測試劑盒
試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat annexin V (ANX- V) ELISA Kit |
貨號 | YS-R12105 |
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
腺苷 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
齊墩果酸 508-02-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
金蕎麥 訂購|咨詢 規(guī)格: 1g
燈盞細辛(燈盞花) 訂購|咨詢 規(guī)格: 2g
白楊素 480-40-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
雷公藤酯甲 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
甲鈷胺 13422-55-4 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg
消旋卡多曲 81110-73-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg
土貝母苷甲 102040-03-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
華蟾精 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥95%,20mg/支;
氧化芍藥苷 39011-91-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
四氫小檗堿 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
人參皂苷F1 53963-43-2 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
2”-O-沒食子?;鸾z桃苷 53209-27-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
野馬追內(nèi)酯A 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支
大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測試劑盒解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
MA-782(小鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
浸麻類芽胞桿菌 Paenibacillus macerans
HCT-8(人盲腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
海棗曲霉 Aspergillus phoenicis
大鼠腦膜細胞*培養(yǎng)基100mL
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
嗜熱側(cè)孢霉
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)
lovo, 人結(jié)腸細胞
噬尼古丁節(jié)桿菌 Arthrobacter nicotinovorans
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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