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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human collagen type IV (Col IV) ELISA Kit |
貨號 | YS-H10745 |
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7-O-白楊素 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
戈米辛G 62956-48-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
穿琥寧 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
新知母皂苷BII 57944-18-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
乙酸酯 76-49-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;0.2ml
血竭素高酸鹽 125536-25-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大豆皂苷Bb 51330-27-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
維生素B5 137-08-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg
水楊酸 69-72-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
月桂烯(香葉烯) 123-35-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥80%;0.5mL
L-賴氨酸鹽 657-27-2 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg
3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ 366814-43-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
三尖杉寧堿 71610-00-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
七葉膽苷XVII 80321-69-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA檢測試劑盒甲苯胺藍(lán)-DNA酶瓊脂/Toluidine Blue-O-Dnase Agar100克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠支氣管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
破傷風(fēng)梭菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Clostridium Tetani Medium250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腸粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
新生牛血清/New born calf serumBR200毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
SMMC-7221全細(xì)胞裂解液100ug100ug
NCI-H295R(人腎上腺質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
One StepWestern Kit AP(Rabbit)/一步法快速WB(AP)試劑盒(兔)2次2次、10次、50次gersion
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA231全細(xì)胞裂解液100ug100ug
LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Hepa 1-6, 小鼠肝細(xì)胞
3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CoC1(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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