公司向您推薦PrimaCell™大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞試劑盒說明書的詳細(xì)說明：

細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實(shí)驗(yàn)操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。   
b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺(tái)；

 載玻片細(xì)胞AKT蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

細(xì)胞色素P450亞酶2C19（S-MEPHENYTOIN）活性高效相色譜法（HPLC）定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

Bouin固著 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：50毫升

 冰凍切片組織PARP蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

轉(zhuǎn)基因棉花SGK321品系基因檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

酸性福爾馬林固著（Formalin-Acetic Acid）   進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：50毫升

 石蠟切片組織PAR-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

pBaBe-PURO＋MiRNA 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：MiRNA表達(dá)

組織乙醇脫氫酶I活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

 細(xì)胞PAR-2蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/50 次

人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pCMV5－RUNX3）感受態(tài)菌DH-5α 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：1毫升

抗原保護(hù)固著（10％中性Formalin 固著）   進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：50毫升

PrimaCell™大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞試劑盒說明書4-羥-6-甲嘧分子式：110.11英文名稱：4- hydroxy -6- methyl group號(hào)：3524-87-6分子量： C5H6N2O

2-乙丁英文名稱：2- ethyl butyrate分子式：116.16分子量： C6H12O2號(hào)：32391

Z907染料英文名稱：Dye 907分子式：870.11分子量： C42H52N6O4RuS2號(hào)：502693-09-6

龍膽苦苷英文名稱：Gentiopicroside分子式：356.33分子量：C16H20O9號(hào)：20831-76-9

5-[4-(甲硫代)]-1H-四唑分子式：192.24英文名稱：5-[4- (]-1H-) four號(hào)：138689-79-9分子量： C8H8N4S

人參皂甙Rg3英文名稱：Ginsenoside Rg3分子式：785.01328分子量：C42H72O13號(hào)：14197-60-5

1,4-二溴-2,5-二氟分子式：271.88英文名稱：1,4- two - dibromo -2,5-號(hào)：327-51-5分子量： C6H2Br2F2

十一烷分子式：232.4英文名稱：Eleven benzene號(hào)：6742-54-7分子量： C17H28

1-(*硅)并三氮唑分子式：191.31英文名稱：1- (three methyl silicone) and three n號(hào)：43183-36-4分子量： C9H13N3Si

甲叔丁英文名稱：Methyl tert butyl ether分子式：88.15分子量： C5H12O號(hào)：1634-04-4

2,3,5-三四唑分子式：426.26英文名稱：Three 2,3,5- four with phenyl iodide號(hào)：13014-90-9分子量： C19H15IN4

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。