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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA檢測(cè)試劑盒>>小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒>> 48T/96T小鼠白介素3(IL-3)ELISA檢測(cè)試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠白介素3(IL-3)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Mouse interleukin 3 (IL-3) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-M9851 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原 0.5mgCKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1)
轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗原 0.5mgE2F2
凝溶膠蛋白抗原 0.5mgGelsolin
熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗原 0.5mgHSTF2/HSF2 peptide
人促黃體生成素(多肽) 0.5mgLH(Luteinizing Hormone)
細(xì)胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原 0.5mgNF-KapBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB)
抑制素/腫瘤抑制因子抗原 0.5mgPHB(Prohibitin)
SP1轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子抗原 0.5mgTSFP1/SP1(transcription factor Sp1)
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A抗原 0.5mgVEGF-A(Vascuoar endothelial growth factor A)
纖維連結(jié)蛋白(多肽抗原) 0.5mgFibronectin (FN)
核小體結(jié)合蛋白1(抗原) 0.5mgNSBP1(Nucleosome-binding protein 1)
腎上髓質(zhì)素(1-52) 0.1mgADM 1-52/AM 1-52/Adrenomedullin 1-52
堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-1(多肽抗原) 0.5mgFGFR1 peptide
核糖體蛋白S6激酶1 0.5mgp70 S6 kinase beta
小鼠白介素3(IL-3)ELISA檢測(cè)試劑盒D-半乳糖醛酸 91510-62-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
異莨菪亭 776-86-3 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
3-乙?;橄闼? 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
土貝母苷丙 115810-13-4 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鳶尾 943989-68-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基 1178-24-1 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
米力農(nóng) 78415-72-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
羅丹明B 81-88-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
甲基黃連堿 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
佛手柑素 7380-40-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大酰胺 130508-46-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
丙二酸 141-82-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
25-脫水澤瀉醇A;澤瀉醇G 155521-46-3 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
酸漿苦味素L 113146-74-0 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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