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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA檢測(cè)試劑盒>>人ELISA檢測(cè)試劑盒>> 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA檢測(cè)試劑盒
人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測(cè)試劑盒
人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA檢測(cè)試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Human adenosine deaminase (ADA) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-H12450 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原 0.5mgCRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2)
EphA1-R受體抗原 0.5mgEphA1 R(Ephrin A1 Receptor)
生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子α 抗原 0.5mgGRO Alpha/GRO/MGSA/CXCL1 protein (growthregulated oncogene Alpha)
白細(xì)胞介素-15抗原 0.5mgIL-15(Interleukin-15)
細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原 0.5mgASK1/MAPKKK5
原癌基因抗原 0.5mgN-ras
Rad51抗原 0.5mgRad51
轉(zhuǎn)錄因子7類(lèi)似物2抗原 0.5mgTCF7L2(transcription factor 7-like 2)
骨鈣素(抗原) 0.5mgBGP(Bone Gla-protein)
艾滋病病毒-1/人類(lèi)免疫缺陷病毒1型(抗原) 0.5mgHIV-1(human immunodeficiency virus type 1)
腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)多肽 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1)
生物素偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgBiotin/BSA
慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA
四環(huán)素偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgTetracycline/BSA
人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA檢測(cè)試劑盒泊苷;Etoposide 33419-42-0 規(guī)格: 20mg
亞木酚素;Secoisolaricir 148244-82-0 規(guī)格: 20mg
相思;L-Abrine 21339-55-9 規(guī)格: 20mg
無(wú)梗五加苷B;Eleutheroside 7374-79-0 規(guī)格: 20mg
苔黑酚葡萄糖苷;Orcilgluco 21082-33-7 規(guī)格: 20mg
似梨木雙黃-7-O-β-D-吡喃葡萄糖 50276-96-5 規(guī)格: 10mg
素;Kaempferide 491-54-3 規(guī)格: 20mg
三七總皂苷;Panax togins 88105-29-7 規(guī)格: 100mg
人參皂苷Re;Ginseside R 52286-59-6 規(guī)格: 20mg
芹菜苷;Apiin 26544-34-3 規(guī)格: 20mg
去氫二異丁香酚;Dehydrodiiso 2680-81-1 規(guī)格: 20mg
泊金異丙酯;Isopropyl 4-H 4191-73-5 規(guī)格: 20mg
毛萼結(jié)甲; Maoecrystal A 規(guī)格: 20mg
馬錢(qián)苷酸;Loganic acid 22255-40-9 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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