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產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 中文名稱 | 蛋白酶激活受體3抗體 |
規(guī)格 | 0.1ml/100μg?0.2ml/200μg | 貨號 | YSRIBIO-018615 |
英文名稱 Anti-PAR3
中文名稱 蛋白酶激活受體3抗體
別 名 Proteinase Activated Receptor 3; coagulation factor II (thrombin) receptor-like 2; Coagulation factor II receptor-like 2; F2RL2; PAR 3; PAR-3; PAR3; PAR3_HUMAN; protease activated receptor3; Proteinase-activated receptor 3; thrombin receptor like 2; Thrombin receptor-like 2.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
貨號 | YSRIBIO-018615 |
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 42kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAR3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:20-100 ICC=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳suan氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
醋鉛試紙 80條/盒,10盒/箱α干擾檢測試劑盒
氟硅鎂 CP,98.0%αS轉(zhuǎn)移檢測試劑盒
氟化鎂 CP,95.0%α黑色激檢測試劑盒
4-肼 AR,≥98.0%α平滑肌肌動蛋白檢測試劑盒
2,9-二甲基-1,10-鄰菲洛啉 99.0%α葡萄糖檢測試劑盒
1-萘鹽鹽 ARα羥基丁脫氫檢測試劑盒
中性紅 for cell culture,≥90%(HPLC)α酮戊二脫氫檢測試劑盒
中性紅 indicator (pH 6.8-8.0)β2微球蛋白檢測試劑盒
氟氫化 AR,99.0%β3腎上腺受體檢測試劑盒
氟鈦 CP,99.0%β氨基己糖檢測試劑盒
氟硅 99.999% metals basisβ氨基己糖A檢測試劑盒
淀粉-化試紙 SZβ半乳糖檢測試劑盒
喹啉硫鹽 CP,95%β淀粉樣蛋白1-40檢測試劑盒
氟化氫鈉 98%β淀粉樣蛋白1-42檢測試劑盒
正釩鈉 99.9%,60目β淀粉樣蛋白25-35檢測試劑盒
Anti-PAR3抗體Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) /FITC 熒光標(biāo)記磷化p21激活激4、5、6抗體IgG
Anti-PAK7/PAK5/MBT/FITC 熒光標(biāo)記抗激活激PAK7/PAK5抗體IgG
Anti--phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) /FITC 熒光標(biāo)記抗磷化核糖體S6蛋白激抗體IgG
Anti-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) /FITC 熒光
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