細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

?
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

 IL-12 P35（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：100微克

載玻片細(xì)胞P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

組蛋白脫乙?；福?/font>HDAC）總活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞纖維素酶（cellulase）活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

721型分光光度儀1毫升1厘米光徑塑料比色皿 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：1個

冰凍切片酸性酶活性染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次

組織CDK6/CYC D3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

純化細(xì)胞色素C氧化酶活性測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組蛋白脫乙酰化酶11（HDAC11）活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞白細(xì)胞介素-1β轉(zhuǎn)換酶（ICE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)菌β-半糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞凝血酶/活化凝血因子II（THROMBIN/FACTOR IIa）活性熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

PrimaCell™大鼠雪旺細(xì)胞試劑盒說明書銀杏內(nèi)酯B英文名稱：Ginkgo biloba B分子式：424.39856分子量：C20H24O10號：15291-77-7

三十六烷英文名稱：Thirty-six alkanes分子式：506.97分子量： C36H74號：630-06-8

(S)-(+)-NBD-APy分子式：249.23英文名稱：（S）-（+）- NBD治療號：143112-52-1分子量： C10H11N5O3

對溴分子式：282.9英文名稱：Bromo iodo號：589-87-7分子量： C6H4Brl

4--2'-硝聯(lián)分子式：224.21英文名稱：4- -2'- - nitrobiphenyl號：75898-34-9分子量： C13H8N2O2

溴鍶分子式：247.43英文名稱：Strontium bromide號：10476-81-0分子量： Br2Sr

1-羥-2-萘甲英文名稱：1- hydroxy -2-分子式：188.18分子量： C11H8O3號：86-48-6

二甲二茂鈦(5%四氫呋/甲溶)分子式：208.13英文名稱：Two methyl two titanocene (5% tetrahydrofuran / toluene solution)號：1271-66-5分子量： C12H16Ti

2--3,5-二硝噻吩英文名稱：2- two nitro thiophene -3,5-分子式：189.15分子量： C4H3N3O4S號：2045-70-7

對氟酸分子式：162.59英文名稱：Of 4-fluorophenylhydrazine hydrochloride號：823-85-8分子量： C6H8ClFN2

重酸氫鉀分子式：389.91英文名稱：Potassium hydrogen carbonate號：13455-24-8分子量： KHI2O6
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。