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T4 DNA連接酶實驗方法

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更新時間:2017-03-14 09:55:41瀏覽次數(shù):251次

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T4 DNA連接酶實驗方法〖英文名稱〗:T4 DNA Ligase

號〗:9015-85-4

分子量:55.3kDa,單體

〖級別〗:BR

來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌

活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量) 

抑制劑:當反應(yīng)體系中NaC1KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性

失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘

注意:T4 DNA LigaseDNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴〖保存〗;轉(zhuǎn)化時,連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯方抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物

質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力

〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:液體。該酶催化雙鏈DNARNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復雙鏈DNARNADNA/RNA復合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP

〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNARNADNA-RNA復合體中缺口的修復;連接酶介導的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態(tài)性

〖保存〗: -20°C

公司產(chǎn)品經(jīng)無數(shù)次市場驗證,若出現(xiàn)非人為操作實驗出不了結(jié)果或產(chǎn)品質(zhì)量問題可無條件換貨或退貨。歡迎各位新老客戶惠顧!

產(chǎn)品名稱

T4 DNA連接酶實驗方法

英文名稱

T4DNALigase

包裝

可根據(jù)客戶要求訂制

T4 DNA連接酶實驗方法儲存條件:
避光、干燥陰涼處封閉貯存,嚴禁與有毒、有害物品混放、混運。本品為非危險 產(chǎn)品可按一般化學品運輸,輕搬動輕放,防止日曬、雨淋!受熱、受潮、受光后易喪失活力,保存期短,因此貯存和運輸條件比較苛刻。
主營業(yè)務(wù):盒、細胞凋亡檢測試劑盒、分子生物學試劑盒。
生化試劑:*生化試劑、進口
試劑盒:酶聯(lián)免疫試劑盒、免疫印跡試劑盒、免疫組化試劑原裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。
細胞:*細胞、國產(chǎn)腫瘤細胞、國產(chǎn)正常細胞。
抗體:免疫組化、免疫熒光、流式細胞檢測、免疫細胞化學。
T4 DNA連接酶實驗方法特點:
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T4 DNA連接酶實驗方法小鼠白細胞介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒   進口分裝   ,英文名:   IL-1B ELISA Kit  Rat regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit    大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA Kit
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