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人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人硫酸類肝素(HS)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human heparan sulfate (HS) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11783 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Smad2
兔抗豚鼠IgG抗血清 1mlRabbit anti-Guinea pig IgG whole serum
驢抗兔IgG 1mgDonkey Anti-rabbit IgG
Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350
Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1mlGoat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488
Cy5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1mlRabbit Anti-rat IgG/Cy5
PE-Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1mlGoat Anti-rat IgG/PE-Cy3
Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1mlGoat Anti-human IgG/Alexa Fluor 350
生物素標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1mlMouse Anti-rabbit IgG/Bio
PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1mlMouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5
Cy5標(biāo)記的兔抗牛IgM 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Cy5
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1mlRabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/PE-Cy7
羅丹明標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.3mlRabbit Anti-Monkey IgG/RBITC
人硫酸類肝素(HS)ELISA檢測試劑盒小鼠X-射線修復(fù)交叉互補蛋白5(XRCC5)ELISA試劑盒 英文名: XRCC5 ELISA Kit
小鼠X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)ELISA試劑盒 英文名: XBP1 ELISA Kit
小鼠Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)ELISA試劑盒 英文名: WFS1 ELISA Kit
小鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)ELISA試劑盒 英文名: WFDC1 ELISA Kit
小鼠V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)ELISA試劑盒 英文名: RELB ELISA Kit
小鼠V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA試劑盒 英文名: RELA ELISA Kit
小鼠V-Myc骨髓細胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)ELISA試劑盒 英文名: MYC ELISA Kit
小鼠V-Jun瘤病毒癌基因同源物(JUN)ELISA試劑盒 英文名: JUN ELISA Kit
小鼠VI型膠原(COL6)ELISA試劑盒 英文名: COL6 ELISA Kit
小鼠VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)ELISA試劑盒 英文名: VGF ELISA Kit
小鼠V-Fos-FBJ骨瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA試劑盒 英文名: FOS ELISA Kit
小鼠V-Ets骨髓成紅細胞增多癥病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA試劑盒 英文名: ETS1 ELISA Kit
小鼠V-Erb小鼠B2紅白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)ELISA試劑盒 英文名: ErbB3 ELISA Kit
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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