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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA檢測(cè)試劑盒>>小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒>> 48T/96T小鼠丙二醛(MDA)ELISA檢測(cè)試劑盒
試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠丙二醛(MDA)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Mice malondialdehyde (MDA) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-M9881 |
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
神經(jīng)纖毛蛋白-2(抗原) 0.5mgNRP-2(neuropilin-2)
磷酸化苷單磷酸活化蛋白激酶α1 1mgphospho-AMPK alpha 1(Thr172) peptaide
重組增強(qiáng)型綠色熒光 100ugRecombinant EGFP protein
蒙蛋白 0.5mgPokemon
熒光素標(biāo)記豬IgG 0.3mlpig IgG/FITC
熒光素PE標(biāo)記人IgG 0.1mlhuman IgG/PE
熒光素Cy3標(biāo)記胰糜蛋白酶 0.1mlAACT/Cy3
羅丹明標(biāo)記羊抗人IgA 0.3mlGoat Anti-human IgA/RBITC
兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 96TbFGF (Rabbit basic fibroblast growth factor) ELISA Kit
鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3 96TC3 ELISA Kit
乙型腦炎病毒 IgG(間接法二步法)EPBV IgG
大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKB Alpha)ELISA Kit
小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2 96TMouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA Kit
植物25羥基維生素D3 96TPlant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit
小鼠丙二醛(MDA)ELISA檢測(cè)試劑盒楊梅素 529-44-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
橄欖苦苷 32619-42-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
烏苯美司 58970-76-6 規(guī)格: 20mg
通關(guān)藤苷G 191729-43-8 規(guī)格: 20mg
紫莖女貞苷C(95%) 規(guī)格: 10mg
酚堿 3738-70-3 規(guī)格: 20mg
血竭素高酸鹽 125536-25-6 規(guī)格: 20mg
戈米辛G 規(guī)格: 10mg
苑子苷A 146501-37-3 規(guī)格: 20mg
染料木苷 529-59-9 規(guī)格: 20mg
5-羥基-7,8-二甲氧基黃 3570-62-5 規(guī)格: 10mg
檸檬苦素 1180-71-8 規(guī)格: 20mg
沒(méi)食子酸辛酯 1034-01-1 規(guī)格: 20mg
連翹苷 487-41-2 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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