當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>ELISA檢測試劑盒>>大鼠ELISA檢測試劑盒>> 大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒
試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit |
貨號 | YS-R11797 |
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
曲克蘆丁;Troxerutin 7085-55-4 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg
菝葜皂苷元;Sarsasapogenin 126-19-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
麥冬皂苷A;Ophiopogonin A 11054-24-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
沒食子酸乙酯;Ethyl gallate 831-61-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
羅紅;Roxithromycin 80214-83-1 訂購|咨詢 規(guī)格: 200mg
蘆薈苷;barbaloin 1415-73-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
酒石酸;D(-)-Tartaric ac 526-83-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
桔梗皂苷D;Platycodin D 58479-68-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
河豚素;Tetrodotoxin 4368-28-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 1mg
根薯內酯A;Taccalolide 108885-68-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
鬼臼素;Podophyllotoxin 518-28-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
N,N’-二蝙蝠葛堿化物 ;N,N 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
燈盞花甲素 ; apigenin-7- 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
對葉百部堿;Tuberostemonin 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
常山乙素;Febrifugine 24159-07-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒熱帶假絲酵母 Candida tropicalis人外周血白細胞*培養(yǎng)基
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠子宮內膜上皮細胞*培養(yǎng)基海洋芽胞桿菌 Oceanobacillus sp.
人關節(jié)軟骨細胞*培養(yǎng)基G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae泡盛曲霉 Aspergillus awamori
大腸桿菌 Escherichia coli棉鈴蟲擬青霉
EB-3(人Burkitt淋巴瘤細胞)人腺腺細胞
酒假絲酵母 Candida kefyrMiaPaCa-2, 人胰腺細胞
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
MKN45(人胃細胞)香菇 Lentinula edodes
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisC6(大鼠膠質瘤細胞)
煙色鏈霉菌 Streptomyces fumosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人成巨核細胞白血病細胞青色吸水鏈霉菌 Streptomyces glaucohygroscopicus
普通變形桿菌* Proteus vulgaris大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基
膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
天狼星紅染色試劑盒茯苓 Poria cocos
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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