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公司向您推薦Primarker™大鼠卵巢上皮細胞鑒定試劑盒說明書的詳細說明:
產(chǎn)品名稱 | Primarker™大鼠卵巢上皮細胞鑒定試劑盒說明書 |
規(guī)格 | 6次/盒 |
貨號 | YS-X7052 |
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長特性,在適當?shù)臅r候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
糖果糖精(saccharin)含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞內(nèi)氧化應激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
冰凍切片組織PASE-7蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
細胞精氨酸(arginine)含量高效相色譜法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞半胱氨酸蛋白酶-5(PASE-5)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞EGFR 蛋白表達比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
肉類乙酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞PAK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
載玻片細胞PASE-5蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
酵母硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細胞單胺氧化酶A型(MAO-A)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
PP2A蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:25次
Primarker™大鼠卵巢上皮細胞鑒定試劑盒說明書貝葉多孔菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
MSC, 小鼠雪旺細胞gersion
小鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
人急性淋巴母細胞白血病細胞苜蓿中華瘤菌 Sinorhizobium meliloti
吲哚培養(yǎng)基/靛基質(zhì)培養(yǎng)基/色氨酸肉湯/色氨酸培養(yǎng)基/Indole Medium細菌靛基質(zhì)試驗250克國產(chǎn)/進口
大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
VCaP(人前列腺細胞)炭曲霉 Aspergillus carbonarius
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 規(guī)格: 1000ml/瓶 用途: 志賀氏菌顯色培養(yǎng)基
小鼠視網(wǎng)膜色素上細胞*培養(yǎng)基100mL
體硫乙醇酸培養(yǎng)基(不含瓊脂)/需氣菌厭氣菌培養(yǎng)基/Thioglycollate Medium(Without Agar)用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確證試驗的細菌培養(yǎng)(GB、SN標準)250克國產(chǎn)/進口
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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