實(shí)驗(yàn)操作步驟： 
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。   
b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

公司向您推薦大鼠小腸上皮細(xì)胞的詳細(xì)說明：

產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長特性，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺(tái)；

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2甘草酸  93%基紫疊氮鈉肉湯（litsky肉湯）pUNO1-hCD7

無菌鹽水染料木苷 from Glycine max (soybean), ≥95% (HPLC)疊氮葡萄糖肉湯pUNO1-hCD70

無菌鹽水人參皂苷Rb3 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%柯氏尿素瓊脂pUNO1-hCD79Aa

無菌采樣袋/均質(zhì)袋葡萄糖 CP察氏液體培養(yǎng)基pUNO1-hCD79Bc

緩沖蛋白胨水BPW牡荊素葡萄糖苷  98%MLCB寒天培地pUNO1-hCD81

培養(yǎng)基豬去氧膽酸 98%無機(jī)鹽培養(yǎng)基pUNO1-hCD82

無菌緩沖蛋白胨水BPW橙皮素 97%桔汁瓊脂pUNO1-hCD8Aa

四硫磺酸鈉煌綠TTB增菌液基礎(chǔ)金絲桃素  96%HB-PET自誘導(dǎo)培養(yǎng)基pUNO1-hCD8Be

溶液丹皮酚 99%馬鈴薯液體培養(yǎng)基（含氯霉素）pUNO1-hCD93

0.1%煌綠溶液靛藍(lán) 98%改良察氏液體培養(yǎng)基pUNO1-hCEBPB

大鼠小腸上皮細(xì)胞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液1.19-1.35mg/L,用于水分析Cefazolin sodium salt 頭孢唑啉鈉煙嘧磺隆Mouse Xaf1(XIAP-associated factor 1) ELISA Kit

Mouse Bach2(BTB domain a and CNC homolog 2) ELISA Kit

紅外光度法測(cè)油標(biāo)準(zhǔn)溶液每套含3瓶Cefepime hydrochloride 頭孢吡肟鹽酸鹽5'－脫氧－5－氟－N－［（戊氧基）羰基］胞苷2'，3'－二酸酯Mouse IL-22(Interleukin 22) ELISA Kit

Mouse IL-27(Interleukin 27) ELISA Kit

正十六烷標(biāo)準(zhǔn)溶液1000mg/L,溶劑:四氯化碳Cefepime 頭孢吡肟抗氧劑BHTMouse monoclonal antibody isotype ELISA Kit

Mouse UCOC(Undercarboxylated Osteocalcin) ELISA Kit

苯標(biāo)準(zhǔn)溶液,4000mg/L,,溶劑:四氯化碳Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢霉素孕甾四烯二酮Mouse ANXA1(Annexin A1) ELISA Kit

Mouse SOST(Sclerostin) ELISA Kit

水質(zhì)鐵與錳混合標(biāo)準(zhǔn)品Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢霉素 1,1’-羰基二(1,2,4三氮唑)Mouse T(Testosterone) ELISA Kit

Mouse CD55(Complement decay-acceleRating factor) ELISA Kit

異辛烷中有機(jī)氯農(nóng)藥混合（I）分析標(biāo)準(zhǔn)品Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢霉素白柳皮提取物Mouse FLG(Filaggrin) ELISA Kit

Mouse DPYSL 2(Dihydropyrimidinase Protein 2) ELISA Kit

姥鮫烷標(biāo)準(zhǔn)溶液1000mg/L,溶劑:四氯化碳Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢霉素  樂卡地平母核Mouse AFP-L3(Alpha-Fetoprotein L3) ELISA Kit

Mouse APT(Mouse Abnormal prothrombin) ELISA Kit

水質(zhì)凱氏氮標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Cefradine 頭孢拉定 馬鈴薯預(yù)糊化粉Mouse Protein Z(Vitamin K-dependent protein Z) ELISA Kit

Mouse CCK-8(Cholecystokinin 8) ELISA Kit

水質(zhì)鉛標(biāo)樣 1.0mg/l,分析標(biāo)準(zhǔn)品Cefradine 頭孢拉定 甘草酸單銨鹽Mouse AAT(Alpha 1 Antitrypsin) ELISA Kit

Mouse KYN(Kynurenine) ELISA Kit

水質(zhì)鋰標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品CeftazidiMe  頭孢他啶天然黃蜂蠟Mouse VLDL(Very Low Density Lipoprotein) ELISA Kit

Mouse SBP1(Selenium-binding protein 1) ELISA Kit

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。