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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠活化素A(Activin-A)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit |
貨號 | YS-R11801 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
二氫草莓酸 97-61-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
橙黃決明素-6-葡萄糖苷 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
白芷屬腦 31575-93-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
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大鼠活化素A(Activin-A)ELISA檢測試劑盒Hep B1.2(人肝細胞)Lysozyme Antibody/溶菌酶
三硝基苯硝胺梭菌 Clostridium saccharoacetobutylicim嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
灰色鏈霉菌 Streptomyces griseus佛羅里達側(cè)耳 Pleurotus florida
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)小鼠垂體瘤細胞
葡萄汁有孢漢遜酵母 Hanseniaspora uvarum人腦膜細胞*培養(yǎng)基
豬苓熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens
吳茱萸次堿厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞*培養(yǎng)基HK-2(人腎小管上皮細胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis
涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis香菇 Lentinula edodes
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)人胰腺細胞
植物桿菌 Lactobacillus plantarum人腺成纖維細胞*培養(yǎng)基
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Ni-Agarose His標簽蛋白純化試劑盒白淺灰鏈霉菌 Streptomyces albogriseolus
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilusEndogenous Enzymes Blocking Buffer/內(nèi)源性堿性磷酸酶封閉液
科恩根霉釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
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