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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat parathyroid hormone (PTH) ELISA Kit |
貨號 | YS-R11903 |
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
金合歡素;刺槐素 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
8-O-乙酰山梔苷甲酯 57420-46-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
小檗堿;黃連素 633-65-8 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
人參皂苷Rh1 63223-86-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
綠原酸 327-97-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
梔子 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 1g
乃近 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 200mg
四環(huán)素 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg;97.6%
澤瀉醇A-24-醋酸酯;Alisol A 18674-16-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
紫蘇葶;Perillartine 30950-27-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
堿;EMetine Hydroc 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
葫蘆巴堿;Trigonelline 6138-41-6 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
蕓香柚皮苷;Narirutin 14259-46-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
銀杏內(nèi)酯C;Ginkgolide C 15291-76-6 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
血竭素;Cochinchinenin 400603-95-4 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA檢測試劑盒 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維蘇云金芽胞桿菌猝倒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. sotto
泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
新型隱球酵母 Cryptococcus neoformans香菇 Lentinula edodes
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管細(xì)胞)香菇 Lentinula edodes
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞
黑曲霉 Aspergillus niger特異青霉(點青霉) Penicillium notatum
大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌
酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremorisRDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞
小鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基屎腸球菌 Enterococcus faecium
膨端青霉 Penicillium inflatum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii人氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
NCI-H292(人肺細(xì)胞)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum
假絲酵母 Candida sp.維涅蘭德固氮菌 Azotobacter vinelandii
小鼠腺腫瘤細(xì)胞小鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基
大鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基威爾酵母 Saccharomyces willianus
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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