中文名稱  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體
英文名稱  Anti-Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400)
濃 度： 1mg/1ml

規(guī) 格 0.1ml/100μg

抗體來源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體

研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

蛋白分子量 predicted molecular weight：

53kDa  

性 狀 Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human MAP3K8/Tpl2 around the phosphorylation site of Ser400

亞 型 IgG

純化方法 affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

別 名 c COT; Cancer Osaka thyroid oncogene; Cancer Osaka thyroid oncogene; CCOT; COT; COT proto oncogene serine/threonine protein kinase; EST; ESTF; Ewing sarcoma transformant; FLJ10486; M3K8_HUMAN; MAP3K 8; MAP3K8; Mitogen activated protein kinase kinase kinase 8; Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 8; Proto oncogene cCot; Proto-oncogene c-Cot; Serine/threonine protein kinase cot; Serine/threonine-protein kinase cot; TPL 2; TPL-2; TPL2; Tumor progression locus 2.

抗體的熒光標(biāo)記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳suan氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨suan的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

1-溴-3-苯 98%去氨精氨加壓(DDAVP)ELISA試劑盒糖原合成激3檢測試劑盒

間溴苯 98%趨化因子C-基元受體1(XCR1)ELISA試劑盒二肽基肽Ⅵ檢測試劑盒

N-芐基哌啶酮 98%趨化因子C-基元配體2(XCL2)ELISA試劑盒胸磷化檢測試劑盒

α-溴代鄰氯苯乙酮   95%趨化因子C-X-C-基元受體7(CXCR7)ELISA試劑盒外膜蛋白A檢測試劑盒

1-溴-4-苯 98%趨化因子C-X-C-基元受體6(CXCR6)ELISA試劑盒精氨；絲氨豐富剪接因子1檢測試劑盒

3-溴聯(lián)苯  97%趨化因子C-X-C-基元受體5(CXCR5)ELISA試劑盒胸腎表達(dá)趨化因子檢測試劑盒

鄰溴苯 98%，含穩(wěn)定劑銅屑趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)ELISA試劑盒胱硫檢測試劑盒

2-氯-5-苯甲 97%趨化因子C-X-C-基元受體3(CXCR3)ELISA試劑盒解脲支原體檢測試劑盒

2-氯噻噸酮 98%趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)ELISA試劑盒奈瑟菌檢測試劑盒

2-氯吩噻 99%趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒磷絲氨檢測試劑盒

鄰氯苯乙酮 98%趨化因子C-C-基元受體7(CCR7)ELISA試劑盒磷羥基酮檢測試劑盒

肉桂酰氯 97%趨化因子C-C-基元受體6(CCR6)ELISA試劑盒3-磷甘油酯檢測試劑盒

3,5-二氯苯 99%趨化因子C-C-基元受體5(CCR5)ELISA試劑盒屋塵螨變應(yīng)原Derp1 IgE抗體檢測試劑盒

3,5-二甲氧基苯 98%趨化因子C-C-基元受體4(CCR4)ELISA試劑盒β-內(nèi)酰檢測試劑盒

3,5-二芐氧基苯甲 98%趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)ELISA試劑盒新型抑癌基因X連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子-1檢測試劑盒
Anti-Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400)抗體Anti-peripherin  外周蛋白抗體

Anti-PERK  蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體

Anti-Phospho-PERK (Thr980)  磷化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體

Anti-PFK2/PFKFB3  6磷果糖激2抗體

Anti-Phospho-PFK2 (Ser466)  磷化6磷果糖激2抗體

Anti-Fascin1  纖維束1抗體

Anti-phospho-FSCN1(Ser39)  磷化纖維束蛋白同源物1抗體

Anti-PG-C  胃蛋白原C抗體