當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>ELISA檢測試劑盒>>小鼠ELISA檢測試劑盒>> 48T/96T小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Mouse insulin receptor beta (ISR- beta) ELISA Kit |
貨號 | YS-M10558 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
DBH / Dopamine beta-Hydroxylase 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
SCG2 / Secretogranin II 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
IGSF8 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
DBH / Dopamine beta-Hydroxylase 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
UNC5A / UNC5H1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
BTN3A3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
BTN3A3 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
CRELD1 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
CRELD1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA IHC-P 50 µg
CRELD1 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
CRELD1 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
FSTL5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
Dim2 / TXNL4B 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
XCL2 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒續(xù)斷對照藥材 規(guī)格: 1g
輪環(huán)藤寧 294-90-6 規(guī)格: 20mg
薯蕷皂苷 19057-60-4 規(guī)格: 20mg
蘇木素 517-28-2 規(guī)格: 20mg
天花粉對照藥材 規(guī)格: 1g
靛藍(lán) 482-89-3 規(guī)格: 20mg
咪康唑 規(guī)格: 100mg
特拉唑嗪 63074-08-8 規(guī)格: 100mg
王不留行 規(guī)格: 1.5g
香荊芥酚 499-75-2 規(guī)格: 0.15ml
戊乙奎 規(guī)格: 100mg
醋酸去氨加壓素 規(guī)格: 20mg/瓶
酸氫吡格雷 135046-48-9 規(guī)格: 100mg
苯甲酰次原堿 規(guī)格: 20mg
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