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人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人叉頭框蛋白04(FoxO4)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human forkhead box protein 04 (FoxO4) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11109 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷酸化N-鈣粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-CDH2 (Tyr820)
周期素依賴性激酶樣5抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CDKL5
尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CDX1
磷酸化細胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-CstF64(Ser498)
膽囊收縮素8抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:CCK8
CD59抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CD59
1號染色體開放閱讀框172抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:C1orf172
cGMP依賴性蛋白激酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:CGK2
磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Crkl(Tyr251)
小腦變性相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CDR2
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CCDC70
3號染色體開放閱讀框39抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:C3orf39
CD36抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:CD36
胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制劑C抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Cystatin C
人叉頭框蛋白04(FoxO4)ELISA檢測試劑盒1瓶 Ehrlich細胞株 Ehrlich 低溫運輸和保存
1瓶 EJ細胞株 EJ 低溫運輸和保存
1瓶 EL4細胞株 EL4 低溫運輸和保存
1瓶 F81細胞株 F81 低溫運輸和保存
1瓶 F9細胞株 F9 低溫運輸和保存
1瓶 FaDu細胞株 FaDu 低溫運輸和保存
1瓶 FC33細胞株 FC33 低溫運輸和保存
1瓶 Fc細胞株 Fc 低溫運輸和保存
1瓶 FDC-P1細胞株 FDC-P1 低溫運輸和保存
1瓶 FIP293細胞株 FIP293 低溫運輸和保存
1瓶 Fox-NY細胞株 Fox-NY 低溫運輸和保存
1瓶 FO細胞株 FO 低溫運輸和保存
1瓶 FRhK-4細胞株 FRhK-4 低溫運輸和保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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