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服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rabbit prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
貨號 | YS-R9949 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
小鼠抗大鼠IgG 1mgMouse Anti-rat IgG
Alexa Fluor 647標記的羊抗雞IgG 0.1mlGoat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 647
PE標記的驢抗豚鼠IgG 0.1mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE
PE標記的羊抗小鼠IgM 0.1mlGoat Anti-Mouse IgM/PE
Alexa Fluor 647標記的羊抗牛IgG 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 647
PE-Cy5.5標記的羊抗雞IgG 0.1mlGoat Anti-Chicken IgG/PE-Cy5.5
Cy5標記的小鼠抗人IgM 0.1mlMouse Anti-human IgM/Cy5
FITC標記的小鼠抗大鼠IgG 0.3mlMouse Anti-rat IgG/FITC
Alexa Fluor 555標記的兔抗生物素抗體IgG 0.1mlRabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 555
Cy7標記的兔抗雞IgM 0.1mlRabbit Anti-chicken IgM/Cy7
堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗豚鼠IgG 0.1mlRabbit Anti-Guinea pig IgG/AP
APC標記的兔抗人IgM 0.1mlRabbit Anti-human IgM/APC
Cy3標記的兔抗小鼠IgG 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG/Cy3
Cy3標記的兔抗大鼠IgM 0.1mlRabbit Anti-rat IgM/Cy3
兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA檢測試劑盒一葉萩堿 5610-40-2 規(guī)格: 20mg
去甲素 1294030 規(guī)格: 20mg
原百部次堿 169534-85-4 規(guī)格: 5mg
鉤藤堿 76-66-4 規(guī)格: 20mg
戈米辛G 規(guī)格: 10mg
牡荊素鼠李糖苷 64820-99-1 規(guī)格: 20mg
蘆根對照藥材 規(guī)格: 1g
醇 52-86-8 規(guī)格: 50mg
白樺脂醇 473-98-3 規(guī)格: 20mg
大青葉 規(guī)格: 1g
丁 62-44-2 規(guī)格: 1000mg
卡林 34787-01-4 規(guī)格: 100mg
魚腥草素鈉 規(guī)格: 50mg
7-表紫杉醇 規(guī)格: 30mg
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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