培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

組織S6 KINASE激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

 CYP1A2蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次

轉(zhuǎn)基因玉米CBH351（starlink）品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）免疫捕獲檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

非蛋白封阻緩沖 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

大米淀粉生物萃取試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

 PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次

M. chelonei RFLP基因分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織環(huán)氧化酶（CYCLOOXYGENASE-1）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）酪蛋白酶譜法（casein-zymography）電泳分析試劑盒（MMP1/3/7/12/13） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次

蛋白質(zhì)西方雜交10倍清理緩沖 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：500毫升

通用型牛傳染性鼻氣管炎（Infectious Bovine Rhinotracheitis；IBR/ Bovine Herpesvirus-1；BHV-1）基因檢測試劑盒   進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

PrimaCell™小鼠肝星狀細胞試劑盒規(guī)格1-乙-5-巰-四氮唑分子式：130.17英文名稱：1- ethyl -5- mercapto tetrazole號：15217-53-5分子量： C3H6N4S

2-氟-5--6-甲吡分子式：126.13英文名稱：2- -5- group -6-號：28489-47-6分子量： C6H7FN2

4'-(4-吡)-2,2':6',2''-三聯(lián)吡分子式：310.36英文名稱：4'- (4-) -2,2': 6', 2''-號：112881-51-3分子量： C20H14N4

4-四氫吡分子式：101.15英文名稱：4- four amino hydrogen pyran號：38041-19-9分子量： C5H11NO

聯(lián)-(4-氯二砜)分子式：503.42英文名稱：Combined (4- two)號：22287-56-5分子量： C24H16Cl2O4S2

氘代溴分子式：162.04英文名稱：Deuterated bromobenzene號：4165-57-5分子量： C6BrD5

3--2--4(3H)喹唑分子式：237.26英文名稱：3- amino -2- phenyl -4 (3H)號：1904-60-5分子量： C14H11N3O

8-溴異喹啉分子式：208.06英文名稱：8- bromide號：63927-22-0分子量： C9H6BrN

(-)-并四咪唑分子式：252.34英文名稱：（-）-并四咪唑號：950194-37-3分子量： C15H12N2S

2-氯-5-羥甲吡分子式：143.57英文名稱：2- Cl -5-號：21543-49-7分子量： C6H6ClNO

4,4-二叔丁聯(lián)分子式：266.42英文名稱：4,4- tert butyl diphenyl號：1625-91-8分子量： C20H26