英文名稱   Anti-eIF4E

中文名稱  真核翻譯起始因子4E抗體

別    名  EIF4F; eIF-4E; eIF 4E; CBP; eIF 4F 25 kDa subunit; CBP; eIF 4E; eIF 4F 25 kDa subunit; EIF 4F; EIF4E1; EIF4EL1; EIF4F; Eukaryotic Translation Initiation Factor 4 E; Eukaryotic translation initiation factor 4E like 1; Messanger RNA Cap Binding Protein eIF 4E.

濃 度：  1mg/1ml

規(guī) 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg     

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品類型  一抗    

研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 24kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human eIF4E

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復）

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳suan氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

抗體分子標記技術：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

3-氯苯乙炔 97%Ⅲ型前膠原(PCⅢ)ELISA試劑盒3-脫氧-阿拉伯庚酮糖-7-磷合檢測試劑盒

2-氯-6-甲氧基吡啶 97%Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)ELISA試劑盒巰基轉(zhuǎn)移檢測試劑盒

氯甲基基硅烷 98%Ⅲ型膠原α1(COL3α1)ELISA試劑盒超氧化物歧化檢測試劑盒

6-氯-1-己烯 97%Ⅲ型膠原(COL3)ELISA試劑盒7-乙氧基-3-異吩惡唑酮-脫乙基檢測試劑盒

2,5-二溴吡啶 99%Ⅱ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)ELISA試劑盒金屬硫蛋白檢測試劑盒

2,6-二溴吡啶 98%Ⅱ型前膠原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA試劑盒辣椒環(huán)斑病檢測試劑盒

1,4-二乙炔基苯 97%Ⅱ型前膠原(PCⅡ)ELISA試劑盒莽草脫氫檢測試劑盒

4,4'-二甲基-2,2'-聯(lián)吡啶 98%Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)ELISA試劑盒多氧化檢測試劑盒

N,N'-二甲基乙二 96%Ⅱ型膠原α1(COL2α1)ELISA試劑盒蛋白(肽酰脯氨酰順;反異構)NIMA結(jié)合1檢測試劑盒

1,8-二溴辛烷 98%Ⅱ型膠原(COL2)ELISA試劑盒RACα絲氨;蘇氨蛋白激檢測試劑盒

2(2-吡啶)酮 98%Ⅱ類主要組織相容性復合體DQβ1(MHCDQβ1)ELISA試劑盒胰島樣生長因子1檢測試劑盒

2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶 98%ⅡD組磷脂A2(PLA2G2D)ELISA試劑盒神經(jīng)肽Y檢測試劑盒

酮基膦二乙酯 96%ⅡA組磷脂A2(PLA2G2A)ELISA試劑盒骨性磷檢測試劑盒

1,4-二氯酞 98%Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試劑盒γ-甲基轉(zhuǎn)移基因檢測試劑盒

2,2'-聯(lián)吡啶 AR,99.0%Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒脂質(zhì)磷2檢測試劑盒
Anti-eIF4E抗體Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) /FITC  熒光標記磷化A-Raf抗體IgG

Anti-JAM1/CD321/FITC  熒光標記連接粘附分子1抗體IgG

Anti-cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC  熒光標記抗cRaf/Raf1抗體IgG

Anti-CREB-1/FITC  熒光標記環(huán)腺應答元件結(jié)合蛋白抗體IgG

Anti-P-CREB-1/FITC  熒光標記磷化環(huán)腺應答元件結(jié)合蛋白抗體IgG

Anti-C-REL/FITC  熒光標記淋巴衍生C-型凝