公司向您推薦PrimaCell™大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞試劑盒的詳細說明：

細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長特性，在適當?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗操作步驟：
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

動物多酚氧化酶（polyphenol oxidase；PPO）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細菌鈣轉(zhuǎn)試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

通用型維生素A含量熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織甘油-3-脫氫酶（Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase）總活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

TSH-BETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次

細胞半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細胞谷氨酰半胱氨酸合成酶（glutamyl systeine synthetase）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

FSH-BETA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：25次

 豆制品維生素U（S-Methylmethionine）比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

真菌/酵母β1，3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

 細胞FSH-BETA蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

通用型亞硝酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：

PrimaCell™大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞試劑盒茵芋苷英文名稱：Skimmin分子式：324.28274分子量：C15H16O8號：93-39-0

乙分子式：106.16英文名稱：Ethyl benzene號：100-41-4分子量： C8H10；C6H5C2H5

4-(二甲氧)分子式：267.37英文名稱：4- (two - methoxy) piperidine號：58258-01-8分子量： C18H21NO

4-氯-6-甲-2-三氯甲喹啉分子式：294.99英文名稱：4- three -6- methyl -2-號：93600-19-2分子量： C11H7Cl4N

乙酸鉬(II)二聚體分子式：428.06英文名稱：Acetate (II) two號：14221-06-8分子量： C8H12Mo2O8

4-溴-2-硝甲分子式：216.03英文名稱：4- -2- nitro toluene號：60956-26-5分子量： C7H6BrNO2

大黃英文名稱：Rhubarb分子式：284.22042分子量：C15H8O6號：478-43-3

衡州烏藥靈英文名稱：Cocculine分子式：602.58分子量：C30H34O13號：124-87-8

戊雌二英文名稱：Estradiol estradiol分子式：356.5分子量： C23H32O3號：979-32-8

2.3-二氯丙烷英文名稱：2.3- two分子式：分子量：號：

錳酸鉀分子式：197.13英文名稱：Potassium manganate號：10294-64-1分子量： K2MnO4

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。