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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | The human anaphylatoxin C5a / 4 (C4a) ELISA Kit |
貨號 | YS-T11336 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
甲狀微粒體抗體(TM抗體) 96TAnti-TM
大鼠褪黑素 96TMT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit
小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體 96TOMgp-Ab ELISA Kit
槐凝集素 96TSophora japonica agglutinin,SJA ELISA Kit
小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白 96TMouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit
人CXC趨化因子受體3 96TCXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3) ELISA Kit
小鼠褪黑素 96TMT(Mouse Melatonin) ELISA Kit
人可溶性CD40配體 96TsCD40L(Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand) ELISA Kit
人白介素4 96TIL-4(Human Interleukin 4) ELISA KIT
人膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子 96TGDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT
小鼠可溶性CD30配體 96TsCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit
大鼠抗平滑肌抗體 96TASMA ELISA Kit
人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子 96TGRO Beta/CXCL2/MGSA(Human growth-regulated oncogene Beta/melanoma growth stimulating activity) ELISA Kit
人鱗狀細胞癌相關抗原 96TSCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit
人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA檢測試劑盒250mL Zinc-Formalin Zinc-Formalin 常溫保存
500mL Zymogram Developing Buffer,10X Zymogram Developing Buffer,10X 常溫保存
500mL Zymogram Renaturation Buffer,10X Zymogram Renaturation Buffer,10X 常溫保存
50T H5N1禽流感熒光定量PCR檢測試劑盒(不含反轉錄) H5N1 Bird Flu Realtime PCR Kit 低溫運輸,-20℃保存
50T 阿留申病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 埃博拉病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 埃立克體PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 巴西果仁PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 白喉棒狀桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 白色念珠菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 百日咳桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50T 阪崎腸桿菌PCR試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
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