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人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人受體酪氨酸激酶(RTKs)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human receptor tyrosine kinase (RTKs) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12124 |
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:PDZD6
前列素E合成酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:PTGEs
三磷酸苷受體P2X5抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:P2RX5
神經(jīng)內(nèi)分泌肽QRFP抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:QRFP
磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-ROCK2(Tyr256)
視網(wǎng)膜色素上皮細胞特異性蛋白65抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RPE65
衰老標(biāo)記蛋白30抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Regucalcin/SMP30
環(huán)指蛋白75抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RNF75
RAGEF2蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:RAGEF2
G蛋白結(jié)合蛋白RAB6A抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RAB6A
鉀氯離子轉(zhuǎn)運蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SLC12A6
SLAP2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SLAP2
線粒體相關(guān)富含半胱氨酸蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SMCP
鈉離子/?;悄懰峁厕D(zhuǎn)運蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SLC10A1
人受體酪氨酸激酶(RTKs)ELISA檢測試劑盒大鼠蛋白信號調(diào)節(jié)因子6(RGS6)ELISA試劑盒 英文名: RGS6 ELISA Kit
大鼠蛋白酶激活受體3(PAR3)ELISA試劑盒 英文名: PAR3 ELISA Kit
大鼠蛋白酶激活受體2(PAR2)ELISA試劑盒 英文名: PAR2 ELISA Kit
大鼠蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)ELISA試劑盒 英文名: PKIγ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)ELISA試劑盒 英文名: PKIβ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶N2(PKN2)ELISA試劑盒 英文名: PKN2 ELISA Kit
大鼠蛋白激酶D1(PRKD1)ELISA試劑盒 英文名: PRKD1 ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cθ(PKCθ)ELISA試劑盒 英文名: PKCθ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)ELISA試劑盒 英文名: PKCη ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)ELISA試劑盒 英文名: PKCζ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cε(PKCε)ELISA試劑盒 英文名: PKCε ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)ELISA試劑盒 英文名: PKCγ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)ELISA試劑盒 英文名: PKCβ1 ELISA Kit
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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