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柱式植物DNA提取試劑盒(柱式植物DNAout)

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產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-19 15:10:24瀏覽次數(shù):160次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013214
品牌 YS-P013230
柱式植物DNA提取試劑盒(柱式植物DNAout)原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

柱式植物DNA提取試劑盒(柱式植物DNAout)

50次

YS-P013230

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
QQ截圖20191211135002.jpg

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

人血管緊張素II受體1抗體(ANGⅡR1-Ab)  尼美舒利自噬相關(guān)蛋白18抗體

人血管緊張素II受體2(ANGⅡR2) 硝酸咪康唑自噬相關(guān)蛋白4A抗體

人血管生成素4(ANGPT4)  硝酸咪康唑(標準品)載脂蛋白A4抗體

人血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)  硫酸小諾霉素/硫酸小諾米星/硫酸沙加霉素12脂氧合酶抗體

人血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)  小諾霉素(標準品)血管緊張素III抗體

人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3) MUG;4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸腺苷酸環(huán)化酶3抗體

人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)  米諾地爾血管動蛋白抗體

人血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)  米諾地爾(標準品)腺病早期E1A蛋白抗體

人血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

人血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標準品)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

人髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)  (標準品)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體

人腦多巴神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF) 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體

人成纖維生長因子受體1(FGFR1) (進分)胞質(zhì)乙脫氫酶1抗體

人鈣調(diào)寧蛋白(CNN1)咪唑司汀ADP核糖基化樣因子ARL3抗體

人抗乙酰膽堿受體抗體(Anti-AChR)嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯花生四烯酸15脂氧合酶1抗體

人接觸蛋白相關(guān)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯(標準品)癌增強蛋白2抗體
柱式植物DNA提取試劑盒(柱式植物DNAout)AMPK alpha 2  腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體二甲氧烷 分析標準品,≥99.8% (GC)

AMPK beta 1  腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體烯酸 N,N-二乙基氨基乙酯 95%

phospho-AMPK beta 1(Ser108)  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體1,3-二羥基酮,二聚體 97%

phospho-AMPK beta 1(Ser182)  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體2,2-二羥基偶氮苯 97%

Amylin  糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體二十二碳六烯酸甲酯 98%

beta-Amyloid 1-42(CT)  β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體二十二碳六烯酸甲酯 分析標準品,98%

beta-Amyloid(1-16) (human)  β淀粉樣肽(1-16)抗體(人)鄰苯二甲酸二丁酯 分析標準品

beta-Amyloid(1-16)   β淀粉樣肽(1-16)抗體(小鼠、大鼠)2,4-二氯苯氧乙酸 分析標準品
反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 


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