英文名稱   Anti-Epac2/RAPGEF4

中文名稱  鳥嘌呤核苷酸交換因子4

別    名  CAMP GEFII; cAMP regulated guanine nucleotide exchange factor II; cAMP-GEFII; cAMP-regulated guanine nucleotide exchange factor II; CAMPGEFII; CGEF 2; CGEF2; Epac 2; EPAC2; Exchange factor directly activated by cAMP 2; Exchange protein directly activated by cAMP 2; Nbla00496; Putative protein product of Nbla00496; Rap guanine nucleotide exchange factor (GEF) 4; RAP guanine nucleotide exchange factor 4; RAPGEF 4; RAPGEF4; RPGF4_HUMAN.

濃 度：  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg     

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

產(chǎn)品類型  一抗    

研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 116kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human Epac2/RAPGEF4

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)）

抗體的熒光標(biāo)記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

頭孢霉屬大鼠apelin 12(AP12)ELISA Kit，48T/96T 小鼠脂蛋白（Lpa）

白齒菌人克拉拉蛋白(CC16) ELISA Kit，48T/96T 小鼠凝血因子VIII相關(guān)抗原（VIII-Ag）

黑曲霉3.3928小鼠克拉拉蛋白(CC16)ELISA Kit，48T/96T 小鼠血管性血友病因子（VWF)

水霉裸鼠克拉拉蛋白(CC16) ELISA Kit，48T/96T 小鼠纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物檢測(PAP)

黑木耳(AU110)大鼠克拉拉蛋白(CC16) ELISA Kit，48T/96T 小鼠凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物（TAT）

靈芝菌牛腎上腺素(EPI)ELISA Kit，48T/96T 小鼠抗凝血酶受體(ATR)

蓋囊菇人腎上腺素(EPI)ELISA Kit，48T/96T 小鼠凝血酶受體(TR)

粘孢白僵菌小鼠腎上腺素(EPI)ELISA Kit，48T/96T 小鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)

黃毛黎豆根瘤菌豬腎上腺素(EPI)ELISA Kit，48T/96T 小鼠磷脂肌三羥激酶(PI3K)

藤黃檀根瘤菌大鼠腎上腺素(EPI)ELISA Kit，48T/96T 小鼠蛋白激酶B（PKB）

宓花豆根瘤菌人谷氨脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA Kit，48T/96T 小鼠分泌型IgA(sIgA)ELISA試劑盒

毛霉小鼠谷氨脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA Kit，48T/96T 小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)

蟬擬青霉大鼠谷氨脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA Kit，48T/96T 小鼠骨原交聯(lián)（CrossLaps）

石榴小赤殼人上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA Kit，48T/96T小鼠I型腺原蛋白C末端前肽（CICP）

櫻桃樹腐爛病菌小鼠上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA Kit，48T/96T小鼠脫氧吡吩（DPD）
Anti-Epac2/RAPGEF4抗體二茂鐵氨酮合成酶抗體Western封閉(奶粉)

反環(huán)鹽鹽；單氧化酶(MAO)抑制劑高爾體卷曲螺旋蛋白1抗體Western封閉

反環(huán)鹽鹽；單氧化酶(MAO)抑制劑高爾體卷曲螺旋蛋白2抗體Western封閉(尼龍膜)

定影粉戊二輔酶A脫氫酶抗體封閉用脫脂奶粉

黃(>96.5%，BS)GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體封閉用脫脂奶粉

40%氟水溶(39.0~41.0%,BC)絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體Western抗體洗脫(堿性)

熒光定量法蛋白酶活性分析廣泛控制氨合成1樣蛋白1抗體Western抗體洗脫(堿性)